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羊口疮（Contagious ecthyma），又名羊接触传染性脓疱。羊口疮是由羊口疮病毒引起，羊口疮病毒属于痘病毒科副痘病毒属。通常病毒不会出现由发病点系统性的传播，相反，是由结痂病料引起环境污染来传播病毒。此病的发病率高，死亡率低，通常情况下，羔羊的死亡率较高。本研究通过采集山东威海地区与云南昆明地区奶山羊养殖场病羊发病部位结痂，进行分离鉴定两株羊口疮病毒。并将羊口疮病毒威海株与昆明株强毒株分别传代，制备其弱毒株，将弱毒株进行了动物安全性试验和动物抗体效价的测定。研究内容和结果如下：1.羊口疮病毒威海株与昆明株的分离鉴定在培养的犊牛睾丸原代细胞上对山东威海市和云南昆明市某奶山羊养殖场疑似羊口疮（Orf）奶山羊病料进行分离，通过观察细胞病变形态、测定病毒滴度和聚合酶链式反应（PCR）等方法对分离的毒株进行鉴定。结果表明，研磨处理后的病毒液接种于犊牛睾丸原代细胞后盲传至第5代出现病变；测得威海株与昆明株第6代分离株病毒滴度分别为106.5TCID50/mL和106.7TCID50/mL；扩增出羊口疮病毒特异性B2L基因。2.羊口疮病毒威海株与昆明株的弱毒株的制备将已鉴定的羊口疮病毒威海株与昆明株在犊牛睾丸原代细胞传至第85代，分别测其病毒滴度。动物安全性试验对1月龄羔羊进行口唇划痕接种，从第3天起连续观察5天。将已制备的两种弱毒株接种于成年公兔并制备抗体，进行酶联免疫吸附试验（ELISA）与病毒中和抗体试验，结果表明，第85代威海株与昆明株的病毒滴度分别为107.5TCID50/mL和107.6TCID50/mL；发现划痕在第3天愈合，并且没有出现任何病变，证明羊口疮病毒威海株与昆明株分别致弱，无感染性；ELISA测得羊口疮病毒威海株与昆明株的抗体效价分别是1:105和1:106；病毒中和抗体试验测得的羊口疮病毒威海株与昆明株的抗体效价分是1:43和1:37。结论：1.本研究成功分离鉴定了羊口疮病毒山东威海株与云南昆明株。2.通过病毒连续传代试验、山羊安全性试验，成功地完成了两株羊口疮地方分离株的毒力致弱。