【摘 要】
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目的:分离培养、纯化和鉴定神经干细胞,研究干细胞移植治疗脑损伤的可能性.方法:无血清培养增殖和纯化神经干细胞.比较CM、bFGF、EGF和EGF四种培养基刺激干细胞增殖的能力.采
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目的:分离培养、纯化和鉴定神经干细胞,研究干细胞移植治疗脑损伤的可能性.方法:无血清培养增殖和纯化神经干细胞.比较CM、bFGF、EGF和EGF<+>四种培养基刺激干细胞增殖的能力.采用单细胞克隆技术获得神经干细胞克隆.根据干细胞的基本特性和特殊标志蛋白——nestin的检测鉴定神经干细胞.建立脑损伤模型探讨用干细胞移植治疗脑损伤的可行性.结果:通过无血清悬浮培养,传代3次后神经干细胞所占百分比由初始的10﹪上升至80﹪.四种培养基中,CM组克隆形成最少,EGF<+>组克隆形成率最高.统计显示CM组与bFGF组、EGF组和EGF<+>组比较克隆形成率P<0.05,具有统计学意义.单细胞克隆技术所获得的神经干细胞具有连续代传能力,nestin标记阳性,具有诱导分化成神经元、星形胶质细胞和其他神经细胞的能力.移植实验显示1-2月后可明显改善动物进食、活动和简单认知能力.切片证实移植细胞能力成活并与周围脑组织有接触.结论:通过体外无血精培养可获得神经干细胞.用干细胞移植治疗脑损伤是可行的.
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