人胚神经干细胞及人脐血干细胞移植治疗大鼠脑缺血的实验研究

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目的:探讨人胚神经干细胞(hNSCs)的体外生长特性和分化情况,通过建立大鼠短暂性局灶性脑缺血模型,研究hNSCs移植治疗脑缺血大鼠的效果及hNSCs在缺血大鼠脑内的迁移、分化状况。 材料和方法:从自然流产的孕10~13周的人胚脑组织中分离、培养神经干细胞(hNSCs)。采用线栓法制作大鼠脑缺血模型,分别于24h以及7d后经尾静脉移植未分化的hNSCs入脑缺血大鼠体内,对移植前后大鼠进行神经损害严重程度评分(NSS),用免疫组化方法观察移植后hNSCs的迁移、分化状况。 结果:从人胚脑中成功培养出hNSCs,培养条件下呈悬浮状态生长,形成神经球,绝大多数的细胞表达神经干细胞的标记物神经巢蛋白(nestin)。hNSCs移植组大鼠自移植后21d起其NSS显著低于对照组(P<0.05);移植后14、21、28、35d脑组织切片中均可见5—溴脱氧嘧啶尿苷(Brdu)免疫染色阳性细胞,缺血侧明显多于对侧(P<0.05),移植后21、28、35d均明显多于移植后14d(P<0.05):移植组各时间点脑组织切片中均可见nestin染色阳性细胞;在Brdu阳性细胞群中,71.9%-73.8%为胶质纤维酸性蛋白(GFAP)免疫染色
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