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目的：评价尿液流式细胞分析仪UF-1000i测定尿液细菌数的准确性；用全自动尿液流式细胞分析仪UF-1000i确立尿液细菌数的参考区间，为临床上尿路感染的诊断、用药以及疗效的观察等提供帮助。方法：⑴用标准菌株ATCC25922(大肠埃希菌)和ATCC25923（金黄色葡萄球菌）制成一定浓度的菌悬液，选择103～108cfu/ml浓度同时用UF-1000i和细菌培养检测其中的菌落数，对UF1000i进行线性评价，选择103～105cfu/ml的浓度对其进行准确性和精密性评价，选择105cfu/ml用SPSS16.0进行准确性评价。选择16SrDNA基因的保守区作为靶基因确定细菌的通用引物，利用SYBRGreenⅠ荧光染料建立RQ-PCR反应体系。采用含靶基因特异性扩增片段的重组质粒建立标准曲线，从而对不同浓度的E.col样品进行细菌定量，并对其准确性进行评价。模拟服用抗生素及含有死菌的标本，分别用UF-1000i、细菌培养法和实时荧光PCR法细菌计数从分子水平评价UF-1000i；⑵收集263份(133男性，130女性)正常人中段尿，用UF-1000i检测其细菌数和电导率，用全自动生化分析仪测定其肌酐浓度。依照CLSI指导文件规定确立尿液细菌数参考区间，并建立用肌酐浓度和电导率校正后的尿液细菌数参考区间。收集87份门诊病人中段尿，以培养法为“金标准”评价用UF1000i所建立的三个参考区间。结果：⑴UF-1000i在检测ATCC25922和ATCC25923时的线性范围在103～107cfu/ml之间，精密性CV值平均为12.3%，培养法为22.3%。培养法和UF1000i所测定的细菌数无显著性差异（p＞0.05）。实时荧光定量PCR法，其精密性CV值平均为13.2%。培养法和RQ-PCR所测定的细菌数无显著性差异（p＞0.05）。模拟服用抗生素和含有死菌的标本，UF1000i、RQ-PCR、培养法测定的准确性分别为110.5%、89.6%、111.3%、76.9%、50.1%和0%。⑵男性的尿液细菌数，肌酐校正后细菌数及电导率校正后细菌数的参考区间上限分别为23.3个/ul，2.0个/mmolCr和1.4个cm/ulms，女性的分别为353.8个/ul，49.5个/mmolCr和28.1个cm/ulms。87份门诊病人用培养法和UF1000i测定所得结果无显著性差异(P>0.05)。UF1000i细菌计数参考区间诊断尿路感染的特异度为87.5%，灵敏度为80%，约登指数为0.675；电导率校正后的参考区间特异度为86.11%，灵敏度为80%，约登指数为0.611；肌酐校正后的参考区间特异度为88.89%，灵敏度为86.67%，约登指数为0.756。结论：⑴UF1000i性能稳定,细菌计数时其准确度高于细菌培养和RQ-PCR。服用抗生素和生长受破坏的细菌也能准确计数;⑵以肌酐校正的参考区间男性≤2.0个/mmolCr，女性≤49.5个/mmolCr作为UF1000i测定尿液细菌数的参考区间。