耐糖肽类抗生素肠球菌检测和基因分型

来源 :上海第二医科大学 上海交通大学医学院 上海交通大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:sky007
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糖肽类抗生素抑制革兰阳性菌细胞壁的合成.主要作用于细胞壁(UDP-胞壁酸五肽)前体D-丙氨酸-D-丙氨酸,阻断了细胞壁的合成而导致细菌死亡.肠球菌对糖肽类抗生素的耐药性主要是由于细菌获得了编码一系列酶的基因而使肽取消糖生物合成的途径发生改变,造成肽聚糖前体的改变,从而降低了对万古霉素和肽可霉素的亲和力.根据对万古霉素和肽可霉素的耐药程度及耐药性的可诱导活性,目前可分为VANA、VANB、VAND和VANE四种获得性表型和VANC型天然耐药表型.耐万古霉素肠球菌的检测主要有药敏试验、琼脂筛选法和分子生物学方法.药敏试验有纸片扩散法和E试验法.分子生物学法包括多重PCR、PCR-SSCP、DNA测序等方法.本研究通过琼脂筛选法筛选可疑GRE菌株,用E试验和多重PCR对可疑菌株进行vanA、vanB、vanC-1和van-C2/3基因检测,并用多重PCR、PCR-SSCP和DNA测序分析VANC型耐药基因,以了解GRE临床分离株的耐药性及VANC型GRE的基因分型和流行病学.据国外文献报道,GRE临床分离的阳性率呈不断上升趋势,而国内实验室还没有系统筛选GRE的常规方法和耐药基因检测方法.建立并评价检测和研究GRE方法,可为临床微生物室开展常规检验GRE提供参考,并为监测院内GRE的流行和耐药基因的分型打下基础.
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