【摘 要】
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目的:探讨MDR1-siRNA对人卵巢上皮细胞癌耐紫杉醇细胞株SKOV3-TR30黏附性的影响。方法:1.化学合成争对MDR-1的基因为靶目标的siRNA,脂质体法转染SKOV3-TR30细胞。2.EDTA介导
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目的:探讨MDR1-siRNA对人卵巢上皮细胞癌耐紫杉醇细胞株SKOV3-TR30黏附性的影响。方法:1.化学合成争对MDR-1的基因为靶目标的siRNA,脂质体法转染SKOV3-TR30细胞。2.EDTA介导的细胞分离实验,检验转染前后细胞对塑料基底膜的粘附能力。3.MTT法检测转染前后细胞与基底膜及细胞外基质成分LN和FN的粘附能力。4.Western Blot检测转染前后细胞膜表面粘附蛋白CD44v6蛋白量表达的变化。5.免疫荧光观察细胞膜表面CD44v6的变化。6.流式细胞计数对膜蛋白CD44v6的变化做定量比较。结果:1.EDTA介导的细胞分离实验表明,SKOV3-TR30/MDR细胞对塑料基质的粘附能力明显下降(P＜0.05)。2.对细胞外基质和基底膜成分的粘附能力实验表明,SKOV3-TR30/MDR细胞对LN和FN的粘附能力均较转染前明显下降(P＜0.05)。3.Western Bolt法及免疫荧光均观察到转染前后粘附分子CD44v6在细胞中的表达有明显差异,SKOV3和SKOV3-TR30/MDR细胞中未见明显表达,而SKOV3-TR30和SKOV3-TR30/non细胞中表达明显,流式细胞计数显示CD44v6阳性细胞百分率分别为30.72%、31.63%、66.09%和68.15%,SKOV3-TR30/MDR组明显降低。讨论:脂质体介导的MDR1-siRNA转染卵巢癌紫杉醇耐药细胞系SKOV3-TR30后,可使其粘附能力下降。
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