CCR7与VEGF-D在肺癌中的表达及意义

来源 :中国医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hong_77521
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目的探讨CCR7(CC chemokine receptor 7)、VEGF-D蛋白在非小细胞肺癌组织中表达及其与淋巴管密度、淋巴结转移之间关系,揭示CCR7诱导肺癌组织淋巴管形成并促进转移的分子机制。材料与方法一、材料90例非小细胞肺癌组织蜡块来自中国医科大学附属第一医院1980-2005年间手术切除存档蜡块。标本均经10%福尔马林液固定,常规石蜡包埋。二、主要试剂和来源羊抗人CCR7、兔抗人VEGF-D多克隆抗体均购自Santa Cruz公司;SP免疫组化试剂盒、DAB酶底物显色试剂盒均购自福州迈新生物技术开发公司;pLNCX2-CCR7质粒由Sam T.Hwang(National Institutes of Health,USA)惠赠。三、方法应用免疫组织化学染色(SP法)检测90例非小细胞肺癌组织中CCR7和血管内皮生长因子-D(vascular endothelial growth factor-D,VEGF-D)的表达及淋巴管(D2-40染色显示淋巴管)的密度,并联合运用质粒转染技术上调肺癌细胞BE1中CCR7表达,采用RT-PCR和Western blot方法观察VEGF-D的变化情况,分析VEGF-D与CCR7表达的关系。四、统计学分析采用SPSS13.0统计学分析软件,对CCR7和VEGF-D表达与临床病理因素的关系用x~2检验;CCR7与VEGF-D表达的关系采用Spearman等级相关分析,转染前后VEGF-D表达变化及转染效率的检测采用t检验,结果用(?)±S表示,以a=0.05为水准,P<0.05表示有统计学意义。结果免疫组织化学染色显示:CCR7主要表达于肺癌细胞胞质和(或)胞膜,VEGF-D主要表达于肺癌细胞胞质;非小细胞肺癌中CCR7、VEGF-D表达阳性率分别为70%(63/90)和60%(54/90),x~2检验显示CCR7和VEGF-D表达与非小细胞肺癌的临床病理分期(P=0.003;P=0.005)、淋巴管密度(P=0.001;P<0.001)和淋巴结转移(P=0.004;P=0.001)有密切关系,而与年龄、性别、组织学类型无关(P>0.05);此外,CCR7和VEGF-D表达正相关(r=0.455,P<0.001)。向BE1细胞中转染CCR7基因,CCR7表达上调后发现VEGF-D的mRNA和蛋白水平均上调(P<0.05)。结论CCR7可通过上调VEGF-D表达诱导肺癌组织淋巴管形成、促进淋巴结转移。
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