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目的： 了解中小学生中HBsAg、抗-HBs的阳性率和乙肝疫苗（Hepatitis B Vaccine，HepB）强化免疫后抗-HBs无应答率及其影响因素；研究中小学生HepB强化免疫无应答者乙肝病毒（HBV）DNA提取的阳性率和HBV基因S区序列变异情况，基于HBV基因S区序列的进化模型选择，构建进化树，了解测定HBV的基因型，分析产生氨基酸变异的位点与HepB免疫无应答的关系，为今后乙肝预防控制和实验室检测工作提供科学依据。 方法： 选择乌鲁木齐县3所中小学综合性学校的在校学生用酶联免疫试剂法（ELISA）进行乙肝HBsAg、抗-HBs两项血清学指标进行检测，对检测发现HBsAg和抗-HBs两项指标均为阴性的469名中小学生进行0、1两针剂HepB强化免疫接种，第二针剂HepB接种后1个月，再次采用ELISA检测抗-HBs，根据检测结果分为抗-HBs无应答组（病例组）和应答组（对照组），并调查相关暴露因素，采用SPSS17.0软件进行1:2病例对照单因素和多因素条件Logistic回归模型分析，对ELISA检测HBsAg和抗-HBs两项血清学指标均为阴性的469名进行0、1两针剂HepB强化免疫接种后1个月后再次采集的空腹静脉血样用酚氯仿法提取HBV DNA，分析该样本隐匿性乙型病毒性肝炎（OBI）的感染率；利用聚合酶链反应（PCR）扩增HBV基因S区序列，对43份OBI PCR扩增产物进行HBV基因S区（544bp）序列测定，建立HBV序列数据库，并用DNA MEGA5.1软件将测序结果与NCBI国际核苷酸序列数据库协作组（INSDC，原Genbank）收录的对应序列进行对比分析，以获得HBV基因S区序列的同源性关系及核苷酸的变异规律；基于HBV基因S区序列的进化模型选择，在基因S区的测定序列与INSDC收录的参考序列比对的基础上建立进化树，探讨测定HBV的基因型，比较其基因型分布的差别，分析产生变异的核苷酸位点。 结果： 免疫前中小学学生HBsAg阳性率为1.46％，且小学生HBsAg阳性率低于初中学生，男、女生之间无统计差别，汉族、回族、哈萨克族、维吾尔及其它民族之间有统计学差别；HepB接种前中小学生抗-HBs阳性率为67.36%，对469名中小学生进行HepB0、1两针剂强化免疫接种1个月后抗-HBs阳转率达到89.72%，HepB接种后免疫无应答率为11.94%，无应答率中小学生间无统计学差别（P＞0.05）。单因素分析发现，与无应答相关的因素为拔牙（OR=4.932，95%CI1.091～22.295）、分娩地点（OR=0.361，95%CI0.165～0.790）、新生儿出生体重（OR=0.255，95%CI0.116～0.560）、喂养方式（OR=0.423，95%CI0.179～0.999）、新生儿24小时内接种HepB（OR=0.453，95%CI0.209～0.980）；多因素条件Logistic回归分析最终进入模型的因素有拔牙（OR=5.416，95%CI1.197～24.506）、新生儿出生体重（OR=0.410，95%CI0.172～0.979）、分娩地点（OR=0.445，95%CI0.213～0.929）、新生儿24小时内接种HepB（OR=0.399，95%CI0.184～0.863）。469份血样标本中用PCR扩增共发现43份HBV DNA阳性标本，完成测序10份用于本论文，4份出现基因变异，其中1例在α决定簇124-147位氨基酸范围内，1例变异位点在α决定簇上游72位氨基酸处插入C出现氨基酸的移码突变，2例两例变异集中在α决定簇下游。 结论： 中小学生抗-HBs阳性率较低，对学生进行HepB强化免疫非常必要；HepB无应答与多种因素有关，拔牙为造成HepB无应答的危险因素，新生儿正常出生体重、新生儿24小时内接种HepB为促进免疫应答的保护因素；HepB强化免疫接种后中小学生HBV DNA存在不同位点的S区序列变异，这可能是造成HepB强化免疫失败的原因。