精子发生是由一系列细胞增殖和分化步骤所组成的一个持续的、高度有序的过程。卵子生成中,可用的卵子数目是有限的,并且在其出生时便已形成,而精子发生在雄性成体的一生中持续进行。精原干细胞是生精系统的基础,其既可自我分裂更新,也可分化生成后代细胞,并最终生成大量精子。Brinster等（1994）在雄性小鼠上首创的生殖细胞移植系统中,精原干细胞可以从供体鼠中收集,体外操作,转移到不育的受体鼠睾丸中,从而建立生精恢复系统。精原干细胞移植后可以成功地使受体鼠恢复生育能力,并且将供体细胞型传递给下一代。生殖细胞移植系统的建立使人们可以探究影响供体细胞在受体鼠中克隆的各种因子的作用。小鼠受体是干细胞移植中最重要的微环境。研究表明睾酮是影响精原干细胞微环境的直接因素。实验显示,用GnRH激动剂亮丙瑞林处理受体可以抑制受体动物的睾酮水平,从而使供体细胞在受体的克隆得到提高。虽然亮丙瑞林在生殖细胞的移植试验中有促进后期生精恢复作用,但是作用机理不清楚。供体生殖干细胞在受体睾丸中建立生精作用需要若干环节。首先,注射入受体曲细精管中的生殖干细胞必须到达基底膜,而这一过程需要在成体支持细胞中形成一动态的运输走廊。其次,干细胞分裂增殖。最后,干细胞分化产生大量的、连续的生殖细胞,从而生成精子。因为已有研究均采用精原干细胞移植后终点观察法,所以亮丙瑞林有效作用于哪一环节尚不清楚。本研究采用亮丙瑞林处理受体,分别在移植后1周、1月和2月对移植后的受体采样,监测供体细胞在归巢、增殖和分化过程中的不同作用;为了在受体睾丸中确切辨别出供体来源细胞,以GFP标记的精原干细胞作为供体;移植后1周时具有GFP荧光标记细胞在曲细精管基底膜分布的数量表示精原干细胞的归巢;移植后1个月时通过组织切片结果表示精原干细胞的增殖;参与归巢与分化的细胞因子通过RT-PCR技术测定其相应基因的表达而进一步确定激动剂的作用环节。研究发现:在荧光倒置显微镜下观察,细胞移植一天后,供体细胞仍然停留在受体睾丸曲细精管管腔中;细胞移植一周后,曲细精管管腔中的细胞数量明显减少;细胞移植一个月和两个月后,试验组中供体细胞在曲细精管中的克隆面积和数量明显多于对照组。冰冻切片发现,细胞移植一天后,供体细胞仍保持在曲细精管管腔中;细胞移植一周后,供体细胞已到达曲细精管管腔基底膜。石蜡组织切片结果显示,细胞移植一天和一周后,曲细精管管腔仍然保持空泡状;而在细胞移植1个月后,受体睾丸曲细精管管腔膜厚度增加明显,但并未发现有精子形成,试验组与对照组相比,可以看到细胞克隆在曲细精管基底膜上形成了多层细胞。细胞移植2个月后与1个月相比,曲细精管管腔膜继续增厚,各阶段生殖细胞细胞形态清楚,并且有部分精子形成。分子生物学检测表明,精原干细胞归巢必需因子β1整合素在细胞移植一个月内都保持高表达量,并且在细胞移植后一周达到最高值,试验组和对照组之间差异性显著;SCFmRNA在整个测试时间内,随时间延长呈现增长趋势。本试验研究表明,CmRH激动剂亮丙瑞林促进了供体精原干细胞在受体小鼠睾丸曲细精管中的归巢和增殖作用。本研究明确了GnRH激动剂亮丙瑞林在生精恢复过程中的具体作用环节,揭示出精原干细胞所处的微环境对精原干细胞的影响。这不仅在干细胞理论研究上有重要意义,而且对动物的生产及临床实践都具有重要的指导作用。