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【背景】食管癌是世界最常见的恶性肿瘤之一，据2011年CA cancer报道，食管鳞癌发病率位居第8位，死亡率位居第6位[1]。手术及其放化疗是食管鳞癌治疗的主要方式，然而仍然有70%的晚期患者发生淋巴结转移或远处转移。食管癌晚期侵袭转移，严重影响了食管癌患者疗效和预后。侵袭和转移是恶性肿瘤的重要特征之一，也是肿瘤患者最主要的致死原因[2]。食管癌的发生发展是一个复杂的病理生理过程，其具体分子生物学机制包括了cyclinD1和c-Myc的表达水平升高，p53和p16的突变等[3]，此外，研究还报道了基质金属蛋白酶（Matrix metalloproteinases，MMPs)和上皮一间叶转化（Epithelial-mesenchymal transition，EMT)相关分子都参与了食管癌的侵袭转移过程，然而其具体机制尚未完全阐明。近年来，大量研究表明葡萄糖调节蛋78(Glucose regulated protein，GRP78)参与了多种肿瘤的发生发展过程，包括肝癌、结肠癌、肺癌和胃癌等[4]。此外，已有文献报道，GRP78参与了肿瘤的侵袭和转移过程[5]，然而关于GRP78在食管癌侵袭转移方向并未见报道。【目的】1.探讨GRP78在食管鳞癌组织中的表达相关性；2.建立食管癌高低转移细胞亚系，并对其进行验证；3. GRP78在食管癌高低转移细胞亚系中的表达变化；4.在食管癌细胞中，小干扰RNA下调GRP78后探讨GRP78在食管鳞癌侵袭转移中的作用；5.在食管癌细胞中，小干扰RNA下调GRP78后探讨GRP78促进食管鳞癌侵袭转移的可能分子机制。【方法】1.收集113例食管癌患者组织，免疫组织化学方法检测食管鳞癌组织中GRP78的表达，并分析其与临床病理资料的相关性；收集患者预后资料，并分析GRP78表达水平与患者预后的关系；2.收集10例食管癌患者新鲜组织，Western blot和qRT-PCR实验检测GRP78在食管鳞癌患者发生淋巴结转移组织和未发生淋巴结转移组织中的表达水平；3.选用食管癌细胞系EC109，EC9706，利用反复的transwell方法建立食管癌高低转移细胞系，并对其转移能力进行验证；4. Western blot实验和qRT-PCR实验检测GRP78在食管癌高低转移细胞系中的表达水平变化；5.利用小干扰RNA技术下调食管癌高转移细胞中GRP78的表达并对其进行验证，验证成功后，体内裸鼠转移实验及体外transwell、划痕实验检测GRP78在食管鳞癌侵袭转移中的作用；6. Western blot检测下调GRP78的表达后转移相关分子MMPs和EMT相关分子的表达情况，初步分析GRP78在食管鳞癌侵袭转移中的作用机制。【结果】1.通过分析GRP78表达与食管癌患者临床特征分析结果表明，GRP78的表达水平与食管癌淋巴结转移及淋巴管浸润密切相关，GRP78表达越强，食管癌患者的5年生存率越差；2.利用transwell实验成功建立了食管癌高转移细胞系EC109-P,EC9706-P和食管癌低转移细胞系和EC109-N,EC9706-N；并用体外transwell实验，划痕实验对其进行了鉴定，体内裸鼠内脏转移也验证了两对细胞亚系的侵袭转移能力的不同；3. Western blot实验和qRT-PCR实验检测发现在两对高转移细胞系中GRP78表达水平较相应的低转移细胞系表达升高；4.小干扰RNA下调GRP78表达后，Western blot实验验证其下调效果，transwell实验和划痕实验证实两对高转移食管鳞癌细胞在下调GRP78表达后，其侵袭和转移能力明显下降；5.小干扰RNA下调GRP78表达后，体内裸鼠转移实验证实食管鳞癌细胞的侵袭和转移能力下降；6.小干扰RNA下调两对食管癌高转移细胞亚系中的GRP78表达后，MMP2，MMP9表达较对照组相应降低。【结论】1.在食管鳞癌中GRP78表达水平升高，尤其在淋巴结转移和淋巴管侵润的组织中GRP78表达明显升高，GRP78表达水平较高的患者5年生存率较GRP78表达阴性的患者5年生存率降低；2.在食管鳞癌细胞中下调GRP78表达水平后，能在体内外明显抑制食管鳞癌细胞EC109-P及EC9706-P的侵袭和转移能力；3. GRP78对食管鳞癌的侵袭转移作用可能是通过抑制MMP-2和MMP-9的表达来实现的。