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背景与目的邻苯二甲酸酯（phthalates,PAEs）是一类重要的环境污染物,在全球环境中已达到普遍检出的程度,人群暴露非常普遍。邻苯二甲酸二丁酯（di-n-butyl phthalate,DBP）是污染最严重、机体内暴露水平最高的PAEs之一。DBP活性代谢产物为邻苯二甲酸单丁酯（monobutyl phthalate,MBP）。前期的研究主要针对DBP对雄性生殖发育的干扰作用,但关于DBP/MBP暴露下对雌性生殖发育影响的研究却很少,尤其是低剂量下暴露。本次研究探讨低剂量邻苯二甲酸二丁酯（DBP）对类固醇激素合成的刺激作用以及NF-κB-vimentin信号通路在DBP干扰类固醇激素合成中的作用。方法1.21天龄雌性SD大鼠按体重随机分成7组,分别是溶剂对照组、注射对照组、1mg/kg/dayDBP、10mg/kg/dayDBP、500mg/kg/dayDBP、PDTC 组以及1mg/kg/day DBP+PDTC组。从出生后21天开始处理直到出生后33天,共13天。第34天麻醉取血,动物处死后取卵巢、子宫等组织,称重后,一部分保存子宫和卵巢保存于4%多聚甲醛中,另外一部分置于-80℃保存。2.原代培养卵巢颗粒细胞（mGCs）作为体外细胞模型,免疫荧光细胞化学法测定细胞纯度。3.CCK-8法测定mGCs细胞活力。4.ELISA检测大鼠血清和细胞培养液上清中孕酮和雌二醇水平。5.免疫组织化学检测大鼠卵巢组织中vimentin表达。6.免疫荧光细胞化学染色联合激光共聚焦法观察mGCs vimentin表达。7.qRT-PCR测定大鼠组织和mGCs细胞中vimentin mRNA表达。8.Western Blot 测定大鼠组织和 mGCs 细胞中 vimentin、NF-κB p65 和 p-p65蛋白表达。9.应用RNAi技术下mGCs细胞中vimentin的表达,再用MBP(10-10M)刺激mGCs,观察mGCs类固醇激素合成的改变。10.EMSA法检测NF-1κB与vimentin启动子区域结合活力。结果1.大鼠子宫在1mg/kg/day DBP暴露后,体积和重量明显高于对照组（P<0.05）。2.mGCs 的纯度为（94.7±1.9）%。3.与对照组相比,mGCs 活性在 10-12、10-11、10-10、10-9、10-8、10-7、10-6M MBP暴露后,均没有明显变化。4.与对照组相比,大鼠在1mg/kg/day和10mg/kg/dayDBP暴露后,血清孕酮合成明显增加,500mg/kg/dayDBP暴露后,则明显减少（P<0.05）。而血清雌二醇合成各剂量组均明显下降。相对于对照组,mGCs在10-10M MBP暴露后,孕酮合成明显增加（P<0.05）,而雌二醇合成无明显改变。5.1mg/kg/day DBP暴露后,大鼠卵巢vimentin蛋白和mRNA表达量明显高于对照组。500mg/kg/day DBP暴露下,vimentin蛋白和mRNA表达量明显低于对照组（P<0.05）。mGCs暴露于10-10MMBP,vimentin蛋白表达量相对于对照组明显增加（P<0.05）。6.当抑制mGCs vimentin表达后,孕酮合成量也随之减少（P<0.05）。7.大鼠注射PDTC明显下调大鼠卵巢vimentin表达和孕酮合成,并阻滞DBP对vimentin表达和孕酮合成的刺激作用（P<0.05）。BAY11-7082明显降低mGCs vimentin表达和孕酮合成,并阻滞MBP对vimentin表达和孕酮合成的刺激作用（P<0.05）。8.EMSA实验结果表明,MBP(10-10M)增加NF-1κB与vimentin启动子区域结合活性（P<0.05）。结论低剂量DBP/MBP可以通过诱导p-p65表达上调,从而进一步刺激vimentin表达和孕酮合成增加,最终促进雌性生殖发育。