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【目的】研究脂多糖(LPS)对类风湿关节炎(RA)成纤维样滑膜细胞(FLS)中IL-37b、Smad3、NF-κB、caspase-1等表达的影响,对IL-37b胞核内信号转导通路可能机制及影响进行初步探讨。【方法】1、体外培养类风湿关节炎患者成纤维样滑膜细胞(RA-FLS)及骨关节炎患者滑膜成纤维样细胞(OA-FLS),用LPS分别作用RA-FLS及OA-FLS,以未予LPS刺激的RA-FLS及OA-FLS为对照组,LPS浓度为100ng/ml,使用LPS刺激12h后分别用实时定量PCR分别进行检测各组中IL-37b、Smad3、NF-κB、caspase-1等分子的m RNA表达水平。2、用LPS分别作用RA-FLS及OA-FLS,以未予LPS刺激的RA-FLS及OA-FLS为对照组,使用LPS刺激12h后用Western印迹法检测IL-37b、Smad3、NF-κB等分子的蛋白表达水平。3、将RA-FLS及OA-FLS分为3组,第一组为:用LPS作用RA–FLS前2h予以caspase-1抑制剂作用,继续予以LPS刺激12h;第二组为:用LPS分别作用RA-FLS及OA-FLS12h;第三组:对照组,不予以LPS刺激RA-FLS及RA-FLS。使用免疫荧光观察IL-37b细胞内分布情况。【结果】1、LPS对RA-FLS IL-37b、Smad3、NF-κB、caspase-1 m RNA表达的影响。用LPS 100ug/ml刺激RA-FLS、OA-FLS 12h后,实时定量PCR检查结果显示,LPS刺激RA-FLS后IL-37b、Smad3、NF-κB、caspase-1 m RNA的表达水平与对照组比较均具有显著的差异(P<0.05)。LPS刺激后的RA-FLS中IL-37b、Smad3、NF-κB、caspase-1m RNA的表达水平与LPS刺激后的OA-FLS组比较均具有显著的差异(P<0.05)。2、LPS对RA-FLS IL-37b、Smad3、NF-κB等分子蛋白表达的影响。用LPS100 ug/ml刺激RA-FLS、OA-FLS 12h后,用Western印迹法检测结果显示,LPS刺激后RA-FLS IL-37b、Smad3、NF-κB蛋白表达水平与对照组比较明显增多。且蛋白表达水平增加与m RNA水平增加相一致。3、LPS对RA-FLS中IL-37b细胞内外分布的影响。将分好组的3组细胞根据各自不同处理后,使用免疫荧光观察结果显示,经LPS刺激后RA-FLS及OA-FLS中细胞核内IL-37b蛋白分布较对照组明显增多,且LPS刺激后RA-FLS中核内IL-37b分布较LPS刺激后OA-FLS明显增多。使用caspase-1抑制剂组中IL-37b核内分布情况较LPS刺激后RA-FLS组明显减少。未处理的RA-FLS及OA-FLS中IL-37b基本分布于胞核外。【结论】LPS作为促炎物质可上调RA-FLS中IL-37b m RNA和IL-37b蛋白表达,同时可促进IL-37b进入细胞核。上调caspase-1和Smad3的表达可能是其作用机制。