论文部分内容阅读
背景视神经脊髓炎（neuromyelitis optica,NMO）是一种免疫介导的的中枢神经系统（central nervous system,CNS）炎性脱髓鞘疾病,主要累及青壮年,给社会及家庭带来沉重的负担。NMO的病因尚未完全明确,与免疫异常所致的抗体致损星形胶质细胞有关,主要表现为视神经炎和急性横贯性脊髓炎相关症状,如视力减退、肢体麻木无力、运动障碍、自主神经功能异常。病理上则表现为白质脱髓鞘、炎性细胞浸润以及星形胶质细胞病变等。小胶质细胞是CNS的固有免疫细胞,可被CNS的炎症激活,继而成为炎症介质的重要来源。已有的研究表明NMO的病理过程中存在小胶质细胞的活化,但是迄今为止,尚缺乏关于NMO患者小胶质细胞活化标志物的研究。YKL-40、sCD14和sCD163作为小胶质细胞活化的生物标志物,在MS、抗NMDAR脑炎、及炎性肠病患者的脑脊液或血浆中,均可检测它们表达水平升高,这为小胶质细胞活化标志物参与自身免疫性炎性疾病免疫学机制提供了依据。然而,目前对于NMO患者小胶质细胞活化标志物的表达水平与效应仍然缺乏全面的了解,是近年来研究的热点。对该问题的探讨有助于了解NMO疾病的免疫学机制及观察疾病进展程度,并可能提供新颖的疗法。目的1.检测NMO患者CSF中的小胶质活化标志物YKL-40、sCD14、sCD163的表达水平,评估小胶质细胞在NMO患者急性期的活化程度。2.分析脑脊液YKL-40、sCD14、sCD163的浓度与扩展残疾状况量表（EDSS）评分之间的相关性,探讨YKL-40、sCD14、sCD163能否在作为推测NMO疾病活动性的生物标志物,并探索其在鉴别诊断中的作用,为进一步探讨NMO的病理生理机制及临床干预提供理论基础。方法1.该研究纳入2015.01-2019.12南方医科大学南方医院神经内科收住的首次诊断或复发NMO患者103例,多发性硬化（MS）患者15例,以及非感染性非自身免疫性神经疾病患者患者16例。MS和NMO患者的临床复发被定义为新症状发作至少持续24小时,并且入院时EDSS评分超过1.0。所有受试者均由两名神经病学医生进行诊断并评估EDSS评分。2.所有脑脊液样品均在治疗前收集,所有患者均在入院后三天内行腰椎穿刺抽取脑脊液。收集后的脑脊液样品立即离心以分离细胞和较大的颗粒,然后储存在-80℃低温冰箱。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）试剂盒检测所有受试者脑脊液中YKL-40、sCD14和sCD163的水平。ELISA检测按照制造商的说明书进行。3.采用SPSS 26.0（IBM Corp,Armonk,NY,USA）进行统计分析,对符合正态分布的数据用平均值±标准差（mean±SD）表示,不符合正态分布的数据以中位数（四分位数间距）[median（interquartile range）]表示。采用 Kruskal-Wallis 加Dunn检验分析不同亚组之间YKL-40、sCD14和sCD163水平的差异。应用χ2检验进行计数资料的数据比较。采用Spearman’s检验分析YKL-40、sCD14、sCD 163水平与EDSS评分的相关性。采用Spearman’s检验分析YKL-40、sCD 14、sCD 163相互之间的相关性。p<0.05认为有统计学意义。所有图形均使用GraphPad Prism 7.0（GraphPad Software,La Jolla,CA,USA）绘制。结果1.NMO与MS组受试者的发病年龄无统计学差异。NMO组EDSS评分显著高于MS组。2.NMO组的YKL-40浓度明显高于MS组（p<0.001）和对照组（p<0.001）。同时,NMO组的sCD14和sCD163均水平显著高于对照组（p=0.005,p=0.026）。MS组与NMO组及对照组的sCD14浓度无统计学差异。此外,NMO组脑脊液sCD163水平显著低于MS组（p<0.001）,MS组的sCD163浓度也显著高于对照组（p<0.001）。3.在 NMO 组中,YKL-40 与 sCD14（r=0.785,p<0.001）及 sCD163（r=0.326,p<0.001）之间均呈显著正相关关系。此外,sCD14和sCD163浓度之间也呈显著相关性（r=0.375,p<0.001）。但是在 MS 组中,脑脊液 YKL-40、sCD14 和 sCD163浓度相互之间无显著关联。4.NMO组的CSF YKL-40、sCD14和sCD163浓度与EDSS评分均呈显著正相关（YKL-40:p=0.002,r=0.303;sCD14:p=0.001,r=0.312;sCD163:p=0.010,r=0.254）。然而在MS组中,YKL-40、sCD14和sCD163水平与EDSS评分无显著关联。5.ROC曲线分析显示,NMO组与对照组相比,CSF YKL-40的ROC曲线下面积（AUC）是最大的,为0.996。此外,sCD14和sCD163的AUC分别是0.747和0.712,其中YKL-40及sCD163的p值小于0.001。MS与对照组的比较中,sCD163 的 ROC AUC 是最大的,为 0.956,而 YKL-40 及 sCD14 AUC 分别为0.879和0.679,其中YKL-40及sCD163的p值小于0.001。NMO与MS的比较中,YKL-40的ROC曲线下面积是最大的,为0.891,sCD14和sCD163的AUC分别是0.566和0.810,其中YKL-40及sCD163的p值小于0.001。结论在本研究中,我们首次报道了 NMO患者脑脊液中小胶质活化标志物sCD14、sCD163和YKL-40水平的升高,提示在NMO发病过程中存在小胶质细胞活化,可能反映了潜在的神经炎症过程。且NMO组脑脊液YKL-40浓度显著高于MS组,sCD163浓度显著低于MS组,提示NMO与MS患者可能存在不同的小胶质细胞免疫学机制。此外,这些小胶质细胞激活标志物的脑脊液浓度与EDSS评分之间呈正相关,提示小胶质细胞的激活与NMO严重程度及活动性平行,小胶质细胞活化标志物在评估NMO急性期严重程度中的具有潜在作用。ROC曲线分析提示YKL-40及sCD163对NMO有较高的诊断价值。