米曲霉菌次生代谢产物研究

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本论文由三章组成:第一章为米曲霉次生代谢产物研究,是本文的主体部分;第二章介绍了千屈菜质量标准的制定;第三章为综述,对米曲霉的化学成分及生物活性方面的研究状况进行了归纳和总结。米曲霉菌是一类重要的工业真菌,因能分泌多种酶类广泛用于食品发酵等行业,且应用领域仍在不断扩展。为了向米曲霉的安全应用提供更全面的参考信息,并希望从中寻找有药理活性的药物前体,本研究对米曲霉进行了系统的化学成分研究和药理作用探索。从米曲霉的菌丝体及培养液中分离并鉴定12个化合物,分别是12,13-dihydroxy fumitremorgin C(1) , verruculogen(2) , fumitremorgin A(3) ,Aszonalenin(4),acyl Aszonalenin(5),ergosterol(6),ergosterol peroxide (7),1个神经鞘苷(8),烟曲酸(9),12(S)-hydroxy, 13(R)-methoxy-fumitremorgin C(10),麦角甾--5, 22-双烯-3, 7, 9-三醇(11)和软脂酸(12)。化合物10的立体结构尚未见文献报道,确定为新化合物。MTT法初步检测了化合物4、5、6、11对神经细胞的保护作用及增殖影响,发现化合物6在20nM-20μM浓度范围内对H2O2损伤的SH-SY5Y细胞有一定的保护作用,而对CoCl2诱导的该细胞的损伤及其自然增殖没有影响。微量稀释法测试了米曲霉菌丝体提取物、发酵液提取物以及单体化合物4、5、8对金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯氏菌和大肠杆菌的抑菌活性。发现菌丝体提取物1.25~10mg/ml对金黄色葡萄球菌有显著的抑制作用,各受试单体化合物无明显活性。运用RP-HPLC比较了五种培养基培养的米曲霉的次生代谢成分,发现培养条件对米曲霉胞内外代谢物影响较大,胞外代谢物尤其明显。定量分析结果提示化合物2是米曲霉胞内主要代谢产物,化合物5是主要的胞外代谢物。
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