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本试验结合我国食品及饲料中霉菌毒素的污染现状,研究几种具有代表性的霉菌毒素联合作用对人结肠癌细胞(Caco-2)细胞毒性和氧化损伤以及DNA损伤的影响,共分为2个试验。试验Ⅰ:黄曲霉毒素M1(AFM1),作为2B类的人类致癌物,主要存在于牛奶中并且对人类健康有危害作用。有实验研究AFM1和其他毒素混合在一起的毒性作用,然而,相比于其来源毒素黄曲霉毒素B1(AFB1)的毒性研究,关于AFM1的毒性研究是非常少的。本实验首次研究了AFM1与赭曲霉毒素A(OTA),玉米赤霉烯酮(ZEA)和α-玉米赤霉烯醇(α-ZOL)单独和混合对人的结肠癌细胞(Caco-2)交互作用效应。单独毒素对细胞活性的抑制,表现出时间和浓度依赖性。通过MTT法检测的结果表明AFM1在72小时与OTA有相似的细胞毒性,其IC50值为4.10μM,这比ZEA和α-ZOL毒性更强。所有的毒素混合毒性的效果如下所示:OTA+α-ZOL<ZEA+α-ZOL<OTA+ZEA<AFM1+ZEA<AFM1+α-ZOL<AFM1+OTA<OTA+ZEA+α-ZOL<AFM1+ZEA+OTA<AFM1+ZEA+α-ZOL<AFM1+OTA+α-ZOL<AFM1+ZEA+OTA+α-ZOL。应用等效应线图解法分析结果表明,AFM1除了与α-ZOL表现出拮抗作用以外,与其他几种毒素都表现出加性和协同效应。协同效应在所有的毒素混在一起时,表现的最强(CI=0.17±0.05 at IC25)。试验Ⅱ:本试验旨在研究不同剂量黄曲霉毒素(AFB1)和黄曲霉毒素(AFM1)对Caco-2细胞毒性的氧化损伤,DNA损伤及其可能机制。黄曲霉毒素B1(AFB1)和黄曲霉毒素M1(AFM1)是自然界普遍存在的霉菌毒素,并且经常性的出现在食物和饲料中,对人类的健康有很大的风险。很少有文献报道AFB1和AFM1对人类肠道的毒性影响作用。因此,我们的实验来研究这两种毒素对Caco-2细胞的毒性作效果,尤其是与人类成熟的肠道细胞相似的分化后的Caco-2细胞。用AFB1和AFM1处理两种不同生长状态未分化和分化后的细胞,处理时间直到72小时。检测了细胞活性,乳酸脱氢酶(LDH)释放,活性氧(ROS)的含量以及DNA的损伤。实验结果表明AFB1和AFM1都显著性的将低了两种细胞的细胞活性,显著增加了LDH含量,活性氧的含量以及DNA的损伤,并表现出时间和浓度依赖性(p<0.05)。与AFM1相比,AFB1对两种细胞显示出了更强的毒性作用。所有这些结果可能都与细胞内ROS产量相关,过多的ROS可能会导致细胞膜及DNA链的损伤。此外,我们发现分化后的细胞对毒素更加敏感,这可能是因为在分化过程中酶的变化相关。我们的实验结果首次在体外证明了AFB1和AFM1对肠道细胞的DNA损伤,尤其是对分化后的Caco-2细胞。