体外骨髓基质干细胞(MSCs)与Aβ1-40损伤PC12的共育体系

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众所周知,阿尔茨海默病(Alzherimer’s disease,AD)是神经系统变性疾病,目前药物等众多治疗尚无理想疗效,骨髓基质干细胞(marrow stromal cells,MSCs)移植治疗正成为研究热点;研究表明,Aβ在神经元的凋亡过程中发挥了重要作用,β淀粉样蛋白的几种分子片断(包括Aβ1-42,Aβ1-40,Aβ25-35)均可在体外条件下诱导离体培养的细胞发生凋亡,而细胞凋亡活动过盛可能AD渐进性的神经退变的重要原因之一。AD细胞模型国内外采用最多的为PC12细胞;STAT3在细胞的生长、存活、增殖和分化中起重要作用本实验采用的是Aβ1-40损伤的PC12与骨髓基质干细胞共育,模拟移植环境,研究共育微环境中细胞间双向信息反馈对骨髓基质干细胞向神经细胞转分化的作用及对抗损伤的PC12凋亡的保护作用机制。探讨MSCs在该培养体系中的向神经元样细胞分化、营养神经从而对抗神经细胞凋亡等种种生物过程中是否有STAT3的激活与表达。为细胞移植治疗AD提供依据。 方法 1.MSCs培养及形态观察 2.MSCs的免疫荧光鉴定:按常规进行细胞的免疫化学染色以对细胞的种类加以鉴定。所用一级抗体为鉴定间叶细胞的CD44抗体;所用二级抗体为FITC标记的抗兔IgG抗体。 3.PC12培养及传代 4.AD细胞模型的建立及细胞共育微环境建立即细胞实验过程及分组: A组:正常培养的PC12+MSCs共育 B组:Aβ1-40刺激的PC12+MSCs共育
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