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铜绿假单胞菌N Y3是优良的烃降解菌株,除胞内有多种启动烃降解氧化酶外,该菌属有非常丰富的胞外分泌物,除Rha以外其他胞外分泌物对该类菌降解烃的作用鲜有报道。本文从共存有机酸对N Y3菌降解烃效率的影响作用出发,通过实验揭示共存有机酸影响铜绿假单胞菌N Y3降解烃效率的主要原因,是通过影响该菌的胞外分泌物,尤其是吩嗪类物质的分泌量。研究工作有重要理论和实际应用价值。 本论文以N Y3菌株为受试菌种,以单一烷烃为降解对象,借助于紫外光谱、气相、飞行质谱和电子顺磁共振等研究手段展开相关工作,获得以下成果: (1)与十六烷为唯一碳源相比,共存戊二酸、丁二酸、丙二酸、乙酸和草酸等均可促进N Y3菌对十四烷的降解效率,其中共存戊二酸和草酸促进用作较为显著。除草酸外,其他共存有机酸均可促进N Y3菌的生长量。 (2)NY3菌生长胞外液均对十四烷有较高的、至少可持续72h的降解转化效率。胞外液对烃的降解效率与NY3菌分泌于其中的两种氧化还原酶(NADH与GSH)和吩嗪类氧化还原活性物密切相关。NY3菌在各生长条件下,均可分泌四种吩嗪物质:1-羟基吩嗪(PHZ)、绿脓菌素(PYO)、吩嗪1-甲酰胺(PCN)、吩嗪1-羧酸(PCA),生长碳源可影响吩嗪类物质的分泌量。 (3)共存草酸对NY3菌细胞繁殖能力和细胞降解烃的活性均不利,然而,共存草酸却能明显促进N Y3菌对十四烷的降解转化效率。研究表明,共存草酸是通过促进NY3分泌PCA的量而提高烃降解效率的。PCA分泌量与胞外液对十四烷的降解率呈正相关。细胞降解烃的同时,胞外液对烃的降解效率不可忽略。共存草酸可使胞外液对十四烷的降解率约提高28%。草酸共代谢作用可以通过促进NY3菌胞外液中PCA的分泌从而加快胞外液通过自由基机理对十六烷的降解。 (4)体外降解实验结果表明,NY3分泌于胞外的4种吩嗪类物质PCA、PYO、PCN、PHZ等均能与胞外氧化还原辅酶NADH和GSH等配合降解十四烷,8h内十四烷的去除率最大可达到48.1%。吩嗪类与辅酶NADH和GSH配合可产生羟基自由基,而胞外液及其吩嗪类对烃的降解是由这些羟基自由基引发的。 本文的研究结果为N Y3菌修复石油烃污染环境条件优化及其应用奠定理论基础。