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毛囊是皮肤重要而复杂的附属结构,从内向外依次由毛干、内根鞘和外根鞘组成。隆突区是毛囊外根鞘向外隆起的部分,位于皮脂腺导管开口的下方,是立毛肌的附着处。早期研究利用~3H-TdR标记的方法观察皮肤中标记物的分布,发现绝大多数标记保留细胞集中在毛囊外根鞘的隆突区,并且当毛囊受X线处理或毛囊下段被去除后仍能再形成完整的毛囊,因此,人们认为皮肤中多能干细胞存在于毛囊上段隆突区,称为毛囊干细胞(HFSC)。许多研究发现毛囊隆突区干细胞参与毛囊周期的维持以及组织的形成,隆突区细胞具有多向分化潜能,不仅能向下迁移形成毛球部,而且能向上迁移参与表皮更新和毛囊、皮脂腺的再生。目前,毛囊干细胞定位于毛囊隆突区已经得到广泛地认同,并认为在上皮各类干细胞中,隆突区的毛囊干细胞群是最具潜力的干细胞库。但是直到现在对毛囊隆突区培养细胞的生物学性质仍了解甚少,妨碍了人们对毛囊干细胞在毛囊生长、损伤修复以及肿瘤发生等方面研究的深入。本实验中采用改良消化法得到完整的毛囊,根据隆突区形态特征,在体外显微切割分离毛囊隆突区,成功地进行细胞原代和传代培养,并在培养状态下观察细胞的生长特性及表达特征,同时通过检测组织中表面标记物的表达进一步证实毛囊隆突区是毛囊干细胞的栖息地。 β-连环蛋白(β-catenin)是一种胞内糖蛋白,具有双重功能。一是作为附着连接的组成部分,与钙粘蛋白结合形成复合体参与细胞间连接:二是作为信号分子,是wnt信号途径的重要环节,在胚胎发育和肿瘤发生中起主要作用。wnt蛋白与相应受体结合将启动该信号途径的活性,引起β-catenin在细胞内的堆积,β-catenin可以通过核孔进入到细胞核中,作为转录激活因子激活下游靶基因。在绝大多数正常组织中,β-catenin仅见于细胞连接中,有研究显示β-catenin在一些恶性肿瘤如结肠癌、卵巢癌、食管癌、肝癌等肿瘤中表达增强。最近研究发现β-catenin对于毛囊的发生发育是不可缺少的因素。在胚胎期,毛囊发育过程中如果β-catenin基因发生突变,毛囊的正常形成途径受阻。同时β-catenin参与皮肤中干细胞分化途径的选择,为了更加清楚地了解β-catenin与毛囊之间的关系,本实验从四个方面应用IHC和RT-PCR的方法分别检测β-catenin在毛囊周期、发育、损伤修复以及细胞分化中表达的变化。实验结果提示β-catenin对毛囊的生长具有重要的促进作用,可能是毛囊生长和周期维持重要的