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沙棘具有多种营养成分并具有多种生理活性和药理作用,因此以沙棘籽油为原料制成的保健产品、功能性食品与日俱增,但对沙棘籽油软胶囊的质量控制还未有统一的质量标准。沙棘籽油软胶囊是由沙棘籽油、人参提取物、维生素E等主要有效成分组成的具有增强免疫力功能的保健品。本课题研究主要以人参总皂苷、α-生育酚、亚油酸、亚麻酸等主要活性成分来制定该产品的检测方法,测定活性成分的含量并进行其增强免疫力功能研究,为沙棘籽油软胶囊的质量控制以及对保健食品的研究提供依据具有重要意义。课题研究内容主要包括两大方面:一.沙棘籽油软胶囊功效成分含量测定研究目的:建立沙棘籽油软胶囊中人参总皂苷、α-生育酚、亚油酸和亚麻酸含量测定的分析方法,以此为沙棘籽油软胶囊质量控制指标之一。方法:采用70%乙醇为提取溶剂,质量体积比(m/v)为1:100,60℃超声提取30min,大孔树脂过柱洗脱后,香草醛-高氯酸法于560nm处测定吸光度值从而测定人参总皂苷的含量。采用脱醛乙醇提取溶剂,质量体积比(m/v)为1:40,加入5ml的10%抗坏血酸和8ml的氢氧化钾溶液(1+1),80℃水浴回流加热下进行皂化反应30min,冰醋酸中和,定容,静置,过0.45μm滤膜;色谱柱:Thermo C18(4.6×250mm,5μm);流动相:甲醇;流速:1.0mL/min;柱温:30℃;检测波长:292nm;进样量:10μL,HPLC-PDA法测定α-生育酚的含量。采用以石油醚:乙醚(1:1)为提取溶剂,质量体积比(m/v)为1:60,超声提取15min,N2吹干,KOH甲醇溶液(0.5mol/l)甲酯化反应20min,定容,过0.45um滤膜;色谱柱:DB-wax30m0.25mm;柱温:210℃;FID:280℃;SPL:250℃;载气:N2;柱流量:0.5ml/min;分流比:30:1,GC-FID法测定亚油酸和亚麻酸的含量。结果:沙棘籽油软胶囊中人参总皂苷平均加标回收率为93.7%,RSD=2.09%;α-生育酚平均加标回收率为96.39,RSD=1.98%;亚油酸平均加标回收率为98.98%,RSD=1.16%;亚麻酸平均加标回收率为98.63%,RSD=1.09%。结论:本研究建立的方法适用于沙棘籽油软胶囊中人参总皂苷、α-生育酚、亚油酸和亚麻酸含量测定,方法选择性强,操作简单快速。二.沙棘籽油软胶囊增强免疫力功能研究通过动物实验对沙棘籽油软胶囊的安全性进行评价,然后进一步对沙棘籽油软胶囊进行增强免疫力保健功能的试验研究,研究内容包括:碳廓清实验;体重测定;迟发型变态反应(DTH)检测;小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验(半体内法)和脏器/体重比值;抗体生成细胞和血清溶血素实验;ConA诱导的小鼠淋巴细胞转化实验和小鼠NK细胞活性实验。根据《保健食品检验与评价技术规范》(卫生部2003)来判断沙棘籽油软胶囊是否具有增强免疫力功能。