目的：通过观察绞股蓝总皂苷含药血清对UVA照射诱导体外培养成纤维细胞光老化过程中相关细胞因子（IL-1α、IL-6及TNF-α）的分泌的影响，以探讨绞股蓝总皂苷对皮肤光老化的防治效果和作用机制，并深入探讨皮肤光老化发生发展的病理机制。材料与方法：1.含药血清的制备：将8只大鼠随机分4组，每组2只，分别为空白血清组、低剂量含药血清组、中剂量含药血清组及高剂量含药血清组。根据成人绞股蓝服药量和Meeh-Rubner氏公式进行给药量换算后，将绞股蓝总皂苷充分溶于生理盐水给大鼠灌胃，每日1次，共灌胃7天后腹主动脉取血，收集上清，冻存备用。2.细胞培养：采用含10%FBS和1%双抗和DMEM高糖培养基，37℃恒温状态，在5%CO2环境中进行培养。在细胞呈80%融合时开始进行传代培养，弃去培养液，用PBS洗液清洗培养瓶2次，除去培养基，然后在每培养皿加1ml0.25%的胰酶和0.02%EDTA1:1的混合消化液，室温消化2min后，在倒置显微镜下观察到逐渐收缩、纤维状细胞变为椭圆、细胞间隙增大，甚至大部分细胞变为独立的圆形，立即弃掉胰酶，停止消化。800r/min离心5min，弃去上清液，加入细胞冻存液1ml，加入新鲜的细胞培养液1ml，吹打均匀，转移至新培养瓶中，补加4ml新鲜培养液，置于培养箱中培养。3.细胞分组：将处于对数生长期的细胞接种于96孔细胞培养板，共计接种4板，其中1板为空白对照组（A组），不做任何处理，正常饲养。其余3板均进行光老化模型复制，将复制好光老化模型的试验孔分组，每8孔一组，共计5组，分别为：UVA模型组（B组）、空白血清组（C组）、低剂量含药血清组（D组）、中剂量含药血清组（E组）以及高剂量含药血清组（F组）。4.模型复制：按照文献记载的模型复制方法和预实验结果，将接种后的成纤维细胞培养24h后，于UVA灯下进行照射，灯管距离培养板15cm，待照射稳定后测量UVA的照射功率，使照射剂量达到35mJ/cm2，根据公式：UV剂量=UV辅照强度×时间计算。5.照射后观察细胞形态学变化，并采用MTT法检测照射后细胞的增殖活性。MTT法检测细胞增殖活性。6.含药血清干预：各组细胞于模型复制后，更换新鲜培养液，再根据组别分别于实验孔中加入相应含药血清10ul含药血清进行干预后置于二氧化碳培养箱中培养24h，用于指标检测。7.指标检测：取以上6组成纤维细胞上清液进行IL-1α、IL-6及TNF-α含量检测，采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA法）。8.统计学分析：统计分析采用SPSS11.5统计软件进行分析，组间比较用单因素方差分析(One-Way ANOVE)，P＜0.05为有显著性差异。结果：1.随着照射时间的加长，UVA对成纤维细胞的损伤也逐渐增大，在UVA照射的第40和50s时间点上，折线的斜率最大，因此选择照射50s进行成纤维细胞光老化模型复制。此时计算得到的照射剂量为35mJ/cm2。2.对成纤维细胞IL-1α分泌的影响：在经UVA照射后，UVA模型组成纤维细胞培养上清液中IL-1α含量表达水平明显上升（P＜0.01）；在含药血清干预后，与UVA模型组比较，各组成纤维细胞培养上清液中IL-1α的含量显著降低（P＜0.01）。3.对成纤维细胞IL-6分泌的影响：在经UVA照射后，UVA模型组成纤维细胞培养上清液中IL-6含量表达水平明显上升（P＜0.01）；在含药血清干预后，与UVA模型组比较，各组成纤维细胞培养上清液中IL-6的含量显著降低（P＜0.01）。4.对成纤维细胞TNF-α分泌的影响：在经UVA照射后，UVA模型组成纤维细胞培养上清液中TNF-α含量表达水平明显上升（P＜0.01）；在含药血清干预后，与UVA模型组比较，各组成纤维细胞培养上清液中TNF-α的含量显著降低（P＜0.01）。结论：1.绞股蓝总皂苷含药血清对经UVA照射后体外培养人皮肤成纤维细胞分泌的相关细胞因子（IL-1α、IL-6以及TNF-α）的分泌有显著的调节作用，能够有效降低皮肤光老化过程中上述三项指标的过度表达，对皮肤光老化有显著的防治作用。2.皮肤光老化的发生机制与成纤维细胞过度分泌表达IL-1α、IL-6以及TNF-α的含量密切相关，提示皮肤光老化的发生发展机制可能与上述指标的异常变化相关。