论文部分内容阅读
目的:通过检测蛋白尿性肾病患儿尿液中足细胞及其相关蛋白nephrin的表达并分析其变化与临床检测指标的相关性,以探讨蛋白尿性肾病患儿尿足细胞及相关分子nephrin检测的临床意义。方法:选取原发性肾病综合征(PNS)患儿40例,IgA肾病(IgAN)患儿5例,紫癜性肾炎(HSPN)患儿6例,狼疮肾炎(LN)患儿6例,对照组10例。应用抗人podocalyxin多克隆抗体采用间接免疫荧光染色法检测尿沉渣足细胞,酶联免疫吸附法(ELISA)及Western免疫印迹法(Western blotting)检测尿液足细胞相关分子nephrin的表达。计量资料数据用均数±标准差(x±s)表示,采用SPSS13.0统计学软件进行统计学分析,结果以(x±s)表达。多组间差异比较用单因素方差分析(One-Way ANOVA),变量间关系应用spearman相关分析法(多元线性回归分析),P<0.05为差异有统计学意义。结果:(1)PNS组、IgA肾病组、HSPN组、LN组和对照组尿足细胞阳性率分别是32.5 %、20%、33. 3 %、83. 3 %和0 ;LN组足细胞脱落数目显著高于HSPN组、PNS组、IgAN组和对照组,差异有统计学意义( P <0. 05)。尿足细胞阳性患儿血总蛋白、血白蛋白水平显著低于尿足细胞阴性患儿( P < 0. 05),血肌酐水平和尿白蛋白比肌酐比值显著高于尿足细胞阴性患儿( P < 0. 05)。(2)对照组尿液中未检测到nephrin的表达,LN组尿液nephrin表达水平显著高于HSPN组、PNS组、IgAN组和对照组,且差异有统计学意义( P < 0. 05)。(3)蛋白尿性肾病患儿重度蛋白尿组尿液中nephrin表达显著高于轻度蛋白尿组,差异有统计学意义(P<0.01)。(4)17例做过肾穿刺活检的患儿按病理结果分为微小病变组(MCD)、系膜增生(MSPGN)组及局灶节段性硬化(FSGS)组,FSGS组患儿尿nephrin表达显著高于MSPGN组及MCD组,差异有统计学意义(P<0.01)。(5)尿nephrin表达与尿足细胞表达成显著性正相关(r=0.996,P﹤0.05),与尿白蛋白/肌酐比值也呈显著性正相关(r=0.544,P﹤0.05)。(6)Western blotting免疫印迹法可检测出尿液nephrin蛋白,但为剪切片段,分子量大小约为43KD,各疾病组之间尿液nephrin表达的差异同ELISA检测方法的结果一致。结论:多种蛋白尿性肾病患儿尿液均可检测出足细胞及nephrin;尿足细胞及nephrin的表达差异可能有助于FSGS与MCD、MSPGN的鉴别诊断;尿足细胞及nephrin与蛋白尿性肾脏疾病蛋白尿严重程度相关,可作为一种无创性方法来评价蛋白尿性肾脏病的病变程度。