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纤维素是地球上最丰富、最廉价的可再生资源。利用生物技术将纤维素转化成乙醇,具有重要的社会及经济意义。本文对纤维素酶高产菌株的选育、纤维原料的预处理、纤维素酶解糖化、酵母菌株的诱变选育,以及SSF纤维素转化乙醇工艺参数优化等方面进行了研究。通过透明圈法、固体发酵法及菌种拮抗关系,研究了优良稳定的五种真菌的特性,并构建了高产纤维素酶二元混菌体系。结果表明,黑曲霉3.316和绿色木霉3.2942组合菌株生产的纤维素酶活力显著高于其它菌组合(P<0.05),其最优菌种配比为1:1。在实验室规模上,研究了纤维素秸秆的稀碱水解工艺,在121℃、10min、固形物含量8.33%、2%NaOH的条件下,可使木质素去除率达88.57%,纤维素保留率为90.14%。采用固体发酵工艺,针对绿色木霉和黑曲霉的混菌体系,对纤维素酶生产过程中的主要工艺参数进行了优化,研究了底物配比、颗粒度、起始pH、料水比和时间对组合菌种产CMC酶活力和FPA酶活力的影响。其最佳产酶条件:秸秆颗粒度0.246mm,底物配比1:4,培养基起始pH5,料水比1:3.5。以最优方案作优化培养,确定FPA酶活力最佳培养时间5d,酶活力达14.05U/g,CMC酶活力最佳培养时间7d,酶活力达29.40U/g。较单一菌株绿色木霉产生的纤维素酶活力分别提高了48.92%和43.49%。用此纤维素酶酶解预处理后的纤维素秸秆,总还原糖与戊糖得率分别为62.95%和21.73%。纸层析和高效液相色谱分析显示,单糖组分主要是葡萄糖和木糖。采用紫外线诱变,分离、筛选、驯化培养出一株高效戊糖和己糖乙醇发酵菌株UV2。连续传代10次发酵性能无明显变化,表明菌株具有一定的遗传稳定性。采用同步糖化发酵法(SSF)优化乙醇生产工艺,结果表明,适宜的发酵工艺条件为:发酵温度38℃,发酵时间72h,纤维素酶用量20U/g,诱变菌株菌悬液的接种量10%。在此条件下进行乙醇发酵试验,乙醇转化率可达0.368g/g底物。比优化前的乙醇转化率提高了10.60%,较出发菌株提高了36.14%。