肾细胞癌差异蛋白质发现与筛选的实验研究

来源 :北京协和医学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liyuan04981
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目的:应用蛋白质组学技术比较肾细胞癌肿瘤组织与癌旁正常组织、肾癌与肾脏良性占位血清蛋白质表达谱,寻找差异表达的蛋白质。方法:第一部分应用双向电泳分离肾细胞癌及癌旁正常组织蛋白,应用MALDI-TOF/TOF-MS鉴定差异蛋白质;第二部分应用磁珠、MALDI-TOF-MS技术检测肾细胞癌、肾脏良性占位患者血清,发现差异表达的蛋白峰,初步建立肾细胞癌的质谱诊断模型。结果:第一部分成功建立了肾癌、癌旁正常组织的双向电泳蛋白质表达谱;共发现10个差异表达2倍以上的蛋白质点,其中8个蛋白质成功进行了质谱鉴定,肾癌组织膜联蛋白Ⅳ、21染色体开放读码框33蛋白、铁蛋白轻链等蛋白表达上调;酰化氨基酸水解酶-1、ATP合成酶d亚基a亚单位、乳酸脱氢酶H链、组蛋白H2b1等蛋白表达下调第二部分肾癌组与肾脏良性占位组比较,在血清共发现7个差异蛋白峰,应用m/z2945.35、m/z15340.8、m/z6984.51、m/z5819.23这4个蛋白峰建立肾癌诊断模型,诊断肾癌的敏感性83.0%,特异性84.6%;盲法验证,敏感性为80%,特异性81.8%。肾癌局限组与浸润转移组相比,共有17个差异蛋白峰,m/z3686.10、m/z33381.7建立诊断模型,诊断肾癌浸润转移的敏感性100%,特异性66.7%。结论1、蛋白质组学技术是研究肾癌的有力工具;2、细胞代谢酶、细胞骨架蛋白等多种蛋白可能参与了肾癌的病理过程;3、磁珠联合MALDI-TOF-MS可以应用于肾癌血清检测,发现差异蛋白峰,建立诊断模型;4、分析这些差异蛋白有助于肾癌标志物的发现。
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