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第一部分PML（NLS-）蛋白在急性早幼粒细胞NB4细胞的表达及定位目的：验证PML（NLS-）蛋白在NB4细胞的表达及定位。方法：将质粒pCMV-HA-NE电转染NB4细胞，用Western blot法验证质粒转染成功；提取电转染质粒成功的NB4细胞、电转染pCMV-HA的NB4细胞、NB4细胞、K562细胞和正常人中性粒细胞的胞浆和胞核蛋白，用Western blot法检测PML（NLS-）蛋白的表达；免疫荧光法和激光共聚焦检测各种细胞中PML（NLS-）蛋白的定位。结果：Western blot检测NB4-HA-NE细胞成功表达NE蛋白；NE酶成功切割PML-RARα，Western blot检测到NB4-HA-NE细胞胞浆表达PML（NLS-）蛋白，其他类型的细胞胞浆中几乎没有PML（NLS-）蛋白的表达，主要是胞核中表达PML蛋白；免疫荧光和激光共聚焦均可检测到NB4-HA-NE细胞中PML（NLS-）蛋白定位于细胞胞浆，其他类型的细胞中PML蛋白主要定位在细胞胞核。结论：通过Western blot，免疫荧光，激光共聚焦三种方法证明PML（NLS-）蛋白存在于NB4-HA-NE细胞胞浆。第二部分PML（NLS-）蛋白在裸鼠移植瘤中的表达及定位目的：验证PML（NLS-）蛋白在体外裸鼠移植瘤中的表达及定位。方法：通过给裸鼠皮下接种细胞，建立NB4细胞、K562细胞和NB4-HA-NE细胞裸鼠皮下瘤模型，提取细胞中的胞浆和胞核蛋白，用Western blot法检测各种细胞中PML（NLS-）蛋白的表达；免疫荧光，激光共聚焦和免疫组化法检测PML（NLS-）蛋白在移植瘤组织细胞中的定位。结果：成功建立NB4细胞、K562细胞和NB4-HA-NE细胞裸鼠皮下瘤模型；Western blot，免疫荧光，激光共聚焦和免疫组化法检测到NB4-HA-NE细胞裸鼠移植瘤中的PML(NLSˉ)蛋白的表达且定位于细胞胞浆，而NB4和K562细胞裸鼠皮下瘤中PML蛋白主要定位于胞核。结论：运用Western blot，免疫荧光，激光共聚焦和免疫组化法可以检测到PML（NLS-）蛋白在体外裸鼠移植瘤中定位在细胞胞浆。第三部分PML（NLS-）蛋白在临床标本中的表达及定位目的：验证PML（NLS-）蛋白在急性早幼粒细胞白血病（M3型）病人中性粒细胞中的表达及定位。方法：提取临床M3型、非M3型病人及正常人的中性粒细胞，运用Western blot，免疫荧光，激光共聚焦三种方法检测中性粒细胞内PML（NLS-）蛋白的表达与定位。结果： Western blot检测M3型病人的中性粒细胞中表达PML（NLS-）蛋白；免疫荧光和激光共聚焦均可检测到M3型病人的中性粒细胞中PML（NLS-）蛋白定位于细胞胞浆。而非M3型和正常人的中性粒细胞胞浆中几乎没有表达，PML蛋白主要定位于胞核。结论：通过Western blot，免疫荧光，激光共聚焦三种方法可检测到PML（NLS-）蛋白存在于临床M3型病人中性粒细胞胞浆中。