调肝解毒方和针刺对癫痫模型大鼠行为学和脑内GFAP表达的影响

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目的探讨调肝解毒方和针刺对癫痫模型大鼠行为学和脑内GFAP表达的影响。方法取清洁级SD大鼠70只,雌雄各半。随机分为七组,分别为空白组、模型组、中药高剂量组、中药中剂量组、中药低剂量组、针刺组、丙戊酸钠组,每组10只。用化学点燃方法制作癫痫模型,药品选用戊四氮(Pentetrazol,PTZ)。用Lado分级方法判断癫痫模型是否制备成功。通过调肝解毒方和调肝通督针刺方法进行干预治疗。动物饲养并结束治疗后进行行为学检测,观测中药和针刺对大鼠学习记忆和情感的影响。行为学通过癫痫发作潜伏期与发作等级、Y-迷宫实验和旷场实验检测。后参照Paxinos《大鼠脑立体定位图谱》进行脑组织的解剖。解剖的脑组织采用免疫组化方法测定脑内GFAP的表达,从每组大鼠的切片中随机选取10张,每张切片选取相同部位在光镜下进行观察并计算阳性细胞数量。结果1一般生长状况与体重比较空白组正常饲养,没有痫性发作,被毛光泽,无脱毛现象,体重正常增长。治疗前除空白组其余各组癫痫发作模型大鼠出现体重下降,掉毛,被毛光泽度变差,食欲下降等。经过治疗后,模型组体重为192.14±8.51、中药高剂量组体重为291.67±18.73、针刺组体重为294.50±16.91,与模型组相比,中药高剂量组和针刺组大鼠的体重增长比较明显(P<0.01),饮食饮水增加,大鼠被毛光泽度有所恢复,脱毛得到减轻。2癫痫发作等级比较实验过程中空白组没有痫性发作。经过治疗后,观察每组大鼠癫痫发作等级,经过治疗后各组大鼠之间有统计学意义(P<0.01),模型组秩均值为42.29、中药高剂量组为11.83、针刺组为12.44,中药高剂量组和针刺组癫痫发作等级明显低于模型组(P<0.01)。3癫痫发作潜伏期比较实验过程中空白组没有痫性发作。治疗21天后,模型组癫痫发作潜伏时间为252.71±32.75、中药高剂量组为646.56±52.88、针刺组为622.75±47.56、丙戊酸钠组为629.44±29.02,与模型组比较,中药高剂量组、针刺组和丙戊酸钠组均能明显延长癫痫发作的时间(P<0.01)。4 Y-迷宫学习记忆比较治疗21天后测得两天Y-迷宫回避错误数据,第一天Y-迷宫回避错误比较:模型组回避错误为10.14±1.77、空白组为6.40±1.58、中药高剂量组为7.11±1.86、中药中剂量组为8.89±1.27、针刺组为6.88±1.81。与空白组、中药高剂量组、针刺组比较,模型组回避错误有明显统计学差异(P<0.01);与中药高剂量组比较,中药中剂量组回避错误有统计学差异(P<0.05)。第二天Y-迷宫回避错误比较:空白组回避错误为5.70±1.49、中药高剂量组为7.00±1.73、针刺组为6.63±1.69,模型组为9.43±1.72,与空白组和针刺组比较,模型组回避错误有明显统计学差异(P<0.01);与模型组比较,中药高剂量组回避错误有统计学差异(P<0.05)。5旷场实验比较治疗21天后,模型组的旷场得分为11.14±2.41、中药高剂量组为23.33±3.61、中药中剂量组为17.56±2.70、针刺组为21.88±3.56、丙戊酸钠组为19.11±2.93。与模型组比较,中药高剂量组、针刺组、丙戊酸钠组旷场实验得分明显高于模型组(P<0.01);中药中剂量组大鼠的旷场得分则明显低于高剂量组(P<0.01)。6免疫组化结果比较治疗结束后每组大鼠脑内GFAP阳性细胞数比较,空白组为24.10±7.08、模型组为62.71±4.15、中药高剂量组为29.00±3.57、中药中剂量组为35.67±3.77、针刺组为29.25±5.01、丙戊酸钠组为34.33±4.66,空白组、中药高剂量组、针刺组的GFAP阳性细胞数量明显低于模型组(P<0.01);中药高剂量组的GFAP表达数量明显低于中药中剂量组(P<0.01)。结论1戊四氮化学点燃法可以诱发大鼠出现癫痫发作症状,并使大鼠脑内GFAP表达增多、行为学测试表现变差。2调肝解毒方和针刺均能降低癫痫大鼠癫痫发作等级并且能延长癫痫发作潜伏期。3调肝解毒方和针刺均能提升癫痫大鼠的行为学表现,提升大鼠的记忆和学习能力,并且改善大鼠焦虑、抑郁等情绪,可能是通过降低脑内GFAP的表达来实现的。图2幅;表8个;参120篇。
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