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环境雌激素具有类似雌激素的作用,进入生物体内,通过干扰生物体自身激素的合成、分泌、转运、结合、活性反应、代谢和消解,对生物有机体维护正常的动态平衡、繁殖、生长及行为有不利的影响。这些化学物质主要随人类的活动排放到环境中,破坏机体稳定性和调控作用,即使数量很少,也可能影响到各种生物的性行为、生殖功能、免疫系统和神经系统等。植物雌激素是一类具有类似动物雌激素生物活性的植物化学成分,主要有3类:异黄酮类、木酚素类和香豆素类。植物雌激素在体内外表现出雌激素和抗雌激素活性,而这种双相作用主要取决于植物雌激素在细胞培养液中的浓度。目前,局部环境中异黄酮的含量随着相关企业的废水污水排放而增加;异黄酮在饲料添加剂中的含量普遍较高;且人类的异黄酮平均消费量也日趋增加。环境中和生物机体内的高异黄酮含量将对人类本身和其它生物产生巨大副作用。然而,植物雌激素的抗雌激素活性和雌激素活性还没得到足够的重视。Comamonas testosteroni具有关键酶3α-羟类固醇脱氢酶/碳酰基还原酶,因此能够以睾丸酮、孕酮和胆汁酸等类固醇类及黄酮类物质为唯一碳源和能源,通过包含许多酶的氧化代谢途径,完全消化这类底物,因此该菌在这些危害大的稳定化合物的生物修复中起重要作用。本试验首先确定了大豆异黄酮的提取和检测方法,再根据温度、时间、接种量、静止与振荡各处理,来研究几种菌株对大豆粉和大豆制品中异黄酮降解的最佳条件,主要的研究结果如下:1.以不同的有机溶剂为提取液,在不同的温度下超声波提取大豆异黄酮,高效液相色谱法法测定异黄酮浓度变化。结果表明,70%甲醇、70℃下超声波提取两次,第一次25min,第二次20min,提取量相对最高;色谱条件,色谱柱:C18柱;检测器:2996二极管阵列检测器;流动相:甲醇(A);0.25%乙酸水溶液(B),在0min,A为25%,梯度洗脱,终点为55%,增加曲线为6;检测时间:30min;柱温:30℃;流速:1.0 mL/min,能很好的分离出大豆异黄酮成分。2.在温度与时间因素对大豆粉中异黄酮的降解处理中,各菌株的降解率都随着温度从4℃、15℃、25℃到30℃的升高而增大,当温度为30℃时,各菌株的降解率最高;各菌株的降解率随着时间在5d、10d、15d、20d的增加而提高。当温度为30℃,时间为20d时,Ca3的降解率达到最大,为93.9%。方差分析表明:温度因素四水平和时间因素四水平都达到了极显著差异。3.在不同大豆品种的降解处理中,结果表明:各菌株对大豆品种威莱姆斯中异黄酮的降解率最大,其次是东农410。从异黄酮的总降解量分析,异黄酮含量越高的大豆品种,菌株对其的降解率也较高。方差分析说明了菌株因素与品种因素的差异达到了极显著水平。4.细菌浓度与降解率有很大关系,试验分析得出:接种量800μL时的降解率与500μL,500μL与200μL的降解率之间差异达到了极显著水平;而接种量1000μL与800μL的降解率之间显著性差异不明显,所以800μL的接种量较合适。5.在两种无机盐培养基中,MS2比MS1更有利于各菌株对异黄酮的降解。当异黄酮浓度在0.05 mg/mL、0.15 mg/mL、0.65 mg/mL和0.90 mg/mL范围内升高时,各菌对异黄酮的降解率也随着提高,但浓度为0.65 mg/mL和0.90 mg/mL时两者间对降解率的影响无明显差异;从菌株因素分析,Ca3的降解能力表现出最强。6.C.t和Ca3可以在pH环境为5-9的酸碱范围内生长,在pH 7的中性条件下降解能力最强;不同菌株在pH 6与pH 8、pH 5与pH 9间的降解率差异无明显差异。7.对豆制品的降解试验里,30℃下的降解率大于40℃、15℃和4℃下的降解率,且与其它温度达到极显著差异,说明过高的温度不利于降解率的提高;与静止相比,振荡能提高菌株对异黄酮的降解率。