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Scleraxis(Scx)是1995年利用酵母双杂交系统筛查组织特异性蛋白时发现的一个bHLH(basic Helix-Loop-Helix)型转录因子。在早期研究中,人们认为Scx表达在软骨组织中,可能与软骨组织的发育相关。随后的研究发现,Scx事实上表达在肌腱等连结组织中,可能与这类连结组织的发育发生有关。最近的研究表明,Scx对于具有功能的肌腱的发生具有重要的作用。Scx基因敲除的小鼠部分肌腱缺失,且生长出的肌腱结构紊乱,说明了其在肌腱发育过程中扮演了重要的角色。但是,Scx在肌腱发育过程中是如何被调控的,以及其如何参与了肌腱的发育仍然是不清楚的。
在本研究中,我们克隆了Scx基因转录起始位点上游3.2kb的调控元件,并构建了该调控元件的报告基因载体。我们随后在肌腱前体细胞系TTD6中研究了Wnt信号通路的信号分子对该启动子元件的调控作用,发现使用LiCl以及多种GSK3β抑制剂处理能够在TTD6细胞中能够上调所构建报告基因的活性,这表明经典Wnt-catenin信号通路可能参与调控了Scx表达,暗示Wnt信号通路可能参与了肌腱的发育。同时我们也尝试使用染色质免疫共沉淀实验来寻找Scx可能的直接下游靶基因,通过靶基因的信息揭示Scx调控肌腱发生可能的调控机制。