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目的 研究miR-542-3p在肝癌组织和细胞系中的表达情况,探讨miR-542-3p/survivin对肝癌细胞增殖和肿瘤生长影响的机制,以期为肝癌提供新的潜在治疗靶点。材料和方法 1.收集肝细胞癌患者的手术标本,测定miR-542-3p在肝癌组织及癌旁正常肝脏组织中的表达情况并分析miR-542-3p的不同表达水平对患者总体生存的影响。2.检测miR-542-3p在不同肝癌细胞株(Huh7,HepG2,Hep3B和MHCC-LM9)中的表达水平,分别通过过表达和降低miR-542-3p的表达来验证其对肝癌细胞在机体内外生长的影响,体外使用CCK-8检测细胞增殖、流式细胞术检测细胞周期和凋亡、荧光素酶报告基因检测验证miR-542-3p与survivin之间的相互作用。使用裸鼠进行动物实验探索miR-542-3p在体内对肿瘤生长的作用。3.经过生物信息学分析寻找miR-542-3p的潜在靶点并通过qRT-PCR、WB实验、荧光素酶报告基因检测等验证下游靶点survivin与miR-542-3p之间的靶向关系和两者在肝癌组织中表达水平的相关关系,验证miR-542-3p/survivin对肝癌细胞增殖和肿瘤生长的影响。4.通过对靶基因survivin的过表达实验,运用qRT-PCR、CCK-8、裸鼠体内成瘤等实验检测survivin在肝癌发展中的生物学作用,更近一步验证miR-542-3p/survivin对HCC细胞生长的影响。结果 1.miR-542-3p在肝癌组织及癌旁正常肝脏组织中的表达存在差异,肝癌组织中microRNA-542-3p的表达水平明显低于癌旁正常组织(P<0.01)。miR-542-3p在肝癌细胞株及正常肝脏细胞株中的表达存在差异,肝癌细胞株中miR-542-3p的表达水平明显低于正常肝脏细胞株(P<0.01)。高表达miR-542-3p与低表达miR-542-3p的患者总体生存率存在差异,高表达miR-542-3p患者术后的总体生存率明显高于低表达水平组(P=0.007)。2.过表达miR-542-3p后,肝癌细胞HepG2、Huh7的增殖、细胞的生长周期、抗凋亡能力皆被抑制(P<0.05),动物的体内实验结果也显示过表达miR-542-3p后,HepG2和Huh7肝癌细胞株裸鼠皮下成瘤后的肿瘤生长能力也明显受到抑制(P<0.05)。3.通过生物信息学分析和进一步的荧光素酶报告基因检测实验的结果表明,surivin为miR-542-3p的潜在靶点,过表达miR-542-3p后,含有survivin 3’-非翻译区的荧光素酶载体的荧光素酶活性和survivin蛋白的表达显著降低(P<0.05)。降低miR-542-3p的表达后,荧光素酶载体的荧光素酶活性和survivin蛋白的表达显著增加(P<0.05)。4.过表达靶基因survivin后,可以逆转由miR-542-3p过表达所导致的肝癌细胞增殖和裸鼠成瘤后肿瘤生长的抑制。miR-542-3p过表达+Survivin过表达组比单纯miR-542-3p过表达组的细胞增殖能力明显增加(P<0.05),动物体内成瘤实验也表明miR-542-3p过表达+Survivin过表达组比单纯miR-542-3p过表达组的肿瘤上长能力明显增加(P<0.05)。5.通过qRT-PCR进一步分析了人肝癌组织中survivin mRNA和miR-542-3p表达的相互关系,发现survivin mRNA与miR-542-3p表达存在负相关(Pearson相关系数=-0.4594;P<0.05)。结论 miR-542-3p在肝癌细胞系和肝癌组织中表达下降,过表达miR-542-3p后可以抑制肝癌细胞在体内外的增殖;miR-542-3p通过直接靶向survivin而发挥肿瘤抑制作用,miR-542-3p与survivin之间的相互作用可能对肝癌的发生发展产生重要影响;miR-542-3p/survivin轴可能是肝细胞癌的潜在诊断标志物和治疗靶点。