酪氨酸酶由酪氨酸酶基因(tyr)编码产生,是黑色素生物合成途径中的关键酶,其含量和活性直接影响着黑色素生成的速度和产量.黑色素具有独特的结构和性质,功能多种多样,在人体主要存在于皮肤、眼睛及脑黑质等组织,对人体提供某种形式的保护作用,但其作用机制至今还不清楚.临床上许多皮肤病:如黄褐斑、色素痣、白癜风、白化病等均是由于tyr结构改变或表达异常以致酪氨酸酶的量或活性发生改变所引起;基因突变、酪氨酸酶活性异常升高、黑色素合成过度增加被认为是皮肤癌症中恶性程度较高的恶性黑色素瘤(malignant melanoma,MM)的起因,某些神经性疾病如着色性干皮病、帕金森氏综合症、老年痴呆症等都与黑色素缺乏有关,这些疾病均属于难治性疾病,目前尚未有特异有效的治疗方法.因此寻找调控tyr表达的有效方法对由tyr表达失控引起的多种难治疾病的防治具有重要的意义.该研究的主要目的在于:1.采用反义核酸技术抑制小鼠B16细胞tyr表达,观察对B16细胞黑色素合成、增殖力及成瘤性的影响,为色素增高性皮肤病及MM的基因治疗寻求新的思路.2.观察TNF-α(Tumor Necrosis Factor-α)诱导各组B16细胞凋亡以及体内抗小鼠移植性MM作用,为TNF-α应用于临床MM的治疗提供一些理论依据.3.从抗凋亡角度探讨黑色素防紫外线(ultraviolet,UV)损伤的机制,为进一步研究与黑素合成降低有关的一些疾病的发病机理及其治疗提供依据.结论和研究意义:一.tyr反义核酸可以显著抑制B16细胞tyr的表达,同时可以使其增殖能力及成瘤性明显降低,此研究为色素增高性皮肤病及MM的基因治疗提供了新的思路.二.低剂量TNF-α(3000U/d/m)瘤体内注射具有明显的抗MM作用,诱导黑色素瘤细胞的凋亡可能是其抗瘤的主要机制之一.三.黑色素具有抗UV诱导的细胞凋亡作用,这可能是其防UV损伤的主要机制之一.