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果实蝇属(Bactrocera Macquart)是危害水果和蔬菜的重要害虫,也是水果进出口贸易中倍受各国关注的检疫性有害生物。由于辐照处理在技术经济上的可行性,使辐照技术成为植物检疫处理的一种新方法。本文以辐照作为检疫除害处理技术,在研究辐照对木瓜、芒果、莲雾、番石榴果实品质影响的基础上确定了这四种水果的最高耐受剂量;明确了桔小实蝇Bactracrea dorsalis(Hendel)、番石榴实蝇Bactracera correcta(Bezzi)、木瓜实蝇Bactracrea papaya(Drew&Hancock)幼虫辐照后不羽化有效剂量;并研究了辐照对桔小实蝇不同发育阶段其体内酚氧化酶(PPO)、羧酸酯酶(CarE)、乙酰胆碱酯酶(AChE)、超氧化物岐化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)及过氧化物酶(POD)活性的影响;此外本文鉴于桔小实蝇严重危害我国南方果树,对桔小实蝇不育蝇的田间释放技术进行了研究。主要研究结果如下:
1)60Co-γ射线对番石榴、芒果、木瓜、莲雾果实品质的影响通过由高到低的剂量辐照番石榴、芒果、木瓜、莲雾等水果,结果表明:番石榴果实不耐辐照,6169-604Gy处理番石榴果实外观明显变为褐色。用403Gy处理番石榴果实外观较对照变黄,218Gy处理的番石榴外观和主要营养成分与对照没有明显差异,表明番石榴果实最高能耐218Gy辐照处理。用6169-1258Gy辐照的芒果变软,变色,腐烂。839-604Gy辐照芒果果皮颜色较绿,果肉黄绿色,较硬;表明芒果能耐839Gy辐照处理。超过1KGy辐照莲雾,外观出现不同程度的损伤,果肉出现腐烂。200-600Gy辐照莲雾果实,外观与对照无明显差异,通过测定其辐照后主要营养成分表明含糖量增加,可滴定酸略有降低,糖酸比高,较好保持了莲雾的优良品质,确定莲雾果实能耐600Gy辐照处理。用6169-2138Gy处理的番木瓜果实,外观稍有腐烂;番木瓜果实经1258Gy的辐照后外观颜色和硬度明显优于对照,表明番木瓜果实能耐1258Gy辐照处理。
2)桔小实蝇、番石榴实蝇、木瓜实蝇辐照除害处理技术研究辐照人工饲料和水果中桔小实蝇不同发育阶段,比较其幼虫死亡率、老熟幼虫化蛹率和成虫羽化率,明确桔小实蝇3龄幼虫最耐辐照;用不同剂量辐照桔小实蝇、番石榴实蝇、木瓜实蝇3龄幼虫,建立了不羽化率和剂量的相关关系,确定了符合检疫要求LD99.9968剂量值,并进行了大规模试验。用116Gy辐照桔小实蝇3龄幼虫81,543头,没有成虫羽化;用113Gy辐照番石榴实蝇3龄幼虫69,118头,没有成虫羽化;用161Gy辐照木瓜实蝇3龄幼虫68,947头,没有成虫羽化。辐照桔小实蝇不同日龄蛹试验结果表明,7日龄蛹最耐辐照,2日龄蛹最敏感,辐照7、5、2日龄蛹的不羽化剂量分别是1750Gy、486Gy、98Gy。为指导进出口水果检疫除害处理提供重要依据。
3)辐射对昆虫体内多种酶活性的影响测定辐照后桔小实蝇不同发育阶段体内的酶活性,结果表明,辐照主要对虫体内的酚氧化酶、乙酰胆碱酯酶、超氧化物歧化酶活性产生了影响,羧酸酯酶、过氧化氢酶活性变化不大,在正常和辐照的桔小实蝇体内均未测出过氧化物酶活性。不同剂量辐照桔小实蝇各龄幼虫后,体内的超氧化物歧化酶、过氧化氢酶活性降低,随辐照虫龄降低,酚氧化酶、超氧化物歧化酶、过氧化氢酶酶活性越低,与剂量也表现出一定的相关性,剂量越大超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、酚氧化酶酶活性越低,表明辐照对桔小实蝇的保护酶及酚氧化酶均具有一定的抑制作用。不同剂量辐照桔小实蝇各龄幼虫后,均在不同程度诱导了羧酸酯酶的活性,其体内的羧酸酯酶活性均较对照升高。160Gy辐照1龄幼虫,其3龄幼虫体内羧酸酯酶活性为对照的1.9倍。不同剂量辐照桔小实蝇各龄期幼虫后,其体内的乙酰胆碱酯酶因剂量和辐照龄期的不同,酶活性变化也不同。超过20Gy辐照1龄幼虫,其3龄幼虫体内乙酰胆碱酯酶活性均较对照降低,与剂量成反比。2龄、3龄幼虫对辐照的忍耐力增强,辐照剂量超过80Gy时,体内的乙酰胆碱酯酶活性较对照显著升高。
4)辐照对桔小实蝇单条幼虫酶活性及虫体黑化的影响为方便口岸应用,在上述试验的基础上,选取辐照对酶活性影响较大的酚氧化酶、超氧化物歧化酶、乙酰胆碱酯酶三种酶,测定其单头幼虫的酶活性,并观察虫体黑化程度。结果表明,辐照后桔小实蝇超氧化物歧化酶和乙酰胆碱酯酶OD值变化与正常幼虫差异不大,不能用于检测桔小实蝇幼虫是否辐照过;辐照能显著降低桔小实蝇体内酚氧化酶活性,用最低40Gy辐照桔小实蝇的卵、1龄、2龄幼虫后,抑制其3龄幼虫体内酚氧化酶形成,虫体黑化程度降低。用160Gy辐照桔小实蝇卵、1龄和2龄幼虫后,其5日龄3龄幼虫体内的酶氧化酶活性仅为对照的17.55%、25.36%、28.59%,酶活性被抑制。160Gy辐照桔小实蝇1日龄、3日龄3龄幼虫后,其3日龄3龄幼虫体内的酶氧化酶活性分别为对照的61.73%、73.02%,酶活性较对照显著降低,因此通过测定酚氧化酶活性和观察虫体黑化程度,可作为口岸鉴别截获桔小实蝇幼虫辐照与否的方法。
5)桔小实蝇不育蝇田间释放技术研究通过用95Gy处理桔小实蝇7日龄蛹,其羽化雌虫和正常雄虫交配,雌虫不产卵;其羽化后雄虫与正常雌虫交配,共产卵119299粒,全部不孵化,其孵化率为0。因此确定桔小实蝇7日龄蛹不育剂量为95Gy。辐照雄虫和正常雄虫的交配竞争和交配后精子竞争试验结果表明,先与正常雄虫交配然后与辐照后雄虫交配的雌虫(NI)卵的孵化率为71.7%。相反,先与辐照后雄虫交配然后与正常雄虫交配的雌虫(IN)卵的孵化率为54.9%。观察47个交配的雌虫,有13个雌虫与辐照雄虫交配,34个雌虫与正常雄虫交配。正常雌虫与正常雄虫和辐照过雄虫按不同比例混合(N:I为12:0,9:3,6:6,3:9)后卵的平均孵化率分别为:90%,81.1%,64%,34.5%。表明虽然不育雄虫较正常雄虫交配竞争力低,但随着不育雄虫的增加雌虫卵的孵化率显著降低。在番石榴果园释放不育蝇防治野生蝇的试验结果也初步表明,不育蝇与野生蝇交配后能降低野生蝇卵的孵化率,从而也对控制桔小实蝇的发生数量起到一定的作用。桔小实蝇在果园不同方向的回捕不育蝇效果表明,在果园防治区设置不育蝇释放点时,两释放点之间的距离在140m最适宜。蛹在田间释放试验表明,蛹盖沙、不盖沙及用信封释放,对蛹的羽化率都没有显著影响,在田间释放时,考虑应用方便。