家兔呼吸机所致肺损伤过程中热休克蛋白70的表达和细胞因子的关系

来源 :中国人民解放军军医进修学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:victinfy
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目的:探讨在呼吸机所致肺损伤(VILI)的炎症反应中热休克蛋白70(HSP70)表达的机制与意义以及加用呼气末正压(PEEP)的影响。观察机械通气不同时间点心率、血压、平台压、吸气峰压以及动脉血气分析的变化;观察机械通气不同时间点血清中细胞因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素.1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)含量的变化,及其与HSP70表达的关系;观察呼吸机所致肺损伤肺组织中HSP70表达与核因子抑制蛋白α(Ⅰ-κBα)表达的关系,探讨HSP70在VILI中表达的意义,以及加用PEEP的影响。 方法:健康成年雄性新西兰白兔30只,体重2.2~3.2kg,随机分为3组,大潮气量机械通气+3cmH2OPEEP(PEEP组),大潮气量机械通气+0cmH2O PEEP(zEEP组),对照组(NVC组),始终以正常条件通气。实施麻醉和气管切开术后,立即接呼吸机行机械通气,各组通气时间均为4h,实验结束后经颈动脉放血处死动物。(1)在机械通气不同时间点,进行心率、平均动脉血压、平台压、吸气峰压测定及动脉血气分析;(2)机械通气结束后,观察肺组织大体的病理改变、HE染色光镜下病理改变以及肺组织湿/干重(W/D)比值;(3)采用放射性免疫分析(RIA)方法测定机械通气不同时间点血清中细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6的含量;(4)采用免疫组织化学染色法,检测呼吸机所致肺损伤家兔肺组织中HSP70的表达;(5)采用Western-blot法检测呼吸机所致肺损伤家兔肺组织HSP70及Ⅰ-κBα的表达。 结果:(1)致伤机械通气(大潮气量+0cmH2OPEEP,ZEEP组)可使家兔肺间质及肺泡明显水肿,大量炎性细胞浸润,加用PEEP能减轻病理损伤。
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