Ⅰ型鸭肝炎病毒(DHV-Ⅰ)引起的鸭病毒性肝炎(DVH)是一种高致病性传播迅速的疾病，它已经成为威胁养鸭业的主要疾病之一。DHV-Ⅰ主要感染1月龄以下雏鸭，尤其是2周内的更易感。免疫接种是预防和控制鸭肝炎的主要手段。DHV-Ⅰ疫苗通常是通过注射种鸭使其雏鸭获得被动在免疫。为了适应不同层次的检测需要，本文研究并建立了检测DHV-Ⅰ抗体的LAT和间接ELISA两种方法，以用于监控疫苗的免疫效果，指导制订合理的免疫程序。具体研究成果如下：　　 第一，本研究首先通过鸡胚繁殖DHV-Ⅰ弱毒并进行灭活，然后通过对比4种不同的纯化方法，探索出一种简单有效重复性好且利于大量制备纯化病毒的方法--差速超高速离心法，用以制备检测DHV-Ⅰ抗体的抗原。纯化后的抗原采用磷钨酸负染电镜进行观察、鉴定，结果表明经差速超高速离心后杂蛋白很少，病毒粒子清晰。　　 第二，制备建立检测方法所需的鸭源DHV-Ⅰ阳性与阴性血清，并经中和试验验证所制DHV-Ⅰ阳性血清中和效价为1:32，阴性血清不具有中和作用。　　 第三，将经过纯化灭活后的病毒，作为包被抗原，建立了一种检测鸭血清中抗体的间接ELISA方法。通过对反应条件优化，确定了各组分的最适工作条件为：抗原包被浓度为1:800(5.56μg/mL)，样品稀释浓度为1:256，二抗稀释浓度为1:3200，阴阳性临界值为0.249。通过对本方法的评估及对1058份样品的检测结果表明，本试验建立的间接ELISA方法可用于鸭血清中DHV-Ⅰ抗体的实验室检测。　　 第四，将经过纯化灭活的病毒用于致敏聚苯乙烯乳胶，建立了检测DHV-Ⅰ抗体的LAT方法。经过对该LAT进行优化，确定的最佳致敏条件为：致敏温度37℃，病毒致敏量300μg/mL，致敏时间2.5h。通过对本方法的评估及对1058份样品的检测结果表明，本试验建立的LAT方法可用于血清中DHV-Ⅰ抗体水平的临床检测，并通过试验初步确定其临床决定水平为“+++”。　　 第五，为了进一步评估该LAT和间接ELISA方法，将两者进行了一系列的对比试验。首先，应用LAT、间接ELISA、与NT对来自20羽免疫了四次DHV-Ⅰ的鸭血清样本进行检测，结果一致符合且表明样本为阳性。其次，使用间接ELISA和LAT分别对30个阴性血清样本和1个阳性血清样本进行检测，结果两者均能正确选择出阳性样本，并均具有较好的选择性。再次，对相同40个血清样本作倍比稀释后进行的检测表明，虽然LAT与ELISA均表明40个样本均为阳性，但是敏感性方面使用Stata软件包进行Kappa检验表明：LAT与ELISA检测结果的Kappa值为-0.012200，这表明两者敏感性的一致性极差，差异显著，且由均值可见ELISA更敏感。最后，通过对相同的1058个血清样本进行独立检测结果表明：与间接ELISA相比，LAT的敏感性为89.1％，特异性92.7%，总符合率为91.4%，Kappa值为0.815200，95%置信区间为[0.754965，0.875435]，可见两试验结果一致性极强。　　 第六，本文研究的LAT试剂盒还经过了质量控制试验。该试剂盒批间与批内差异不显著，在4℃条件下保存七个月后，其敏感性、特异性均检测不出变化。此外，盲样检测表明该试剂盒具有很好的潜在应用前景和经济价值。