一串红花发育、快繁体系建立及花色基因多态性研究

来源 :东北农业大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:hetongzhixia
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本研究主要是通过对不同花色一串红的花发育过程、组织培养快繁方法和Ss5MaT1基因进行了研究,首次观察一串红的花芽分化和胚胎学有关内容,探讨了影响一串红结实性的原因、最佳组织培养快繁体系,揭示了花色基因Ss5MaT1的多态性, 花发育研究结果表明,一串红的花芽分化是从第4个叶节开始,在第9个叶节时分化结束,花药壁的发育方式为双子叶型,成熟花粉粒为三细胞型,胚囊的发育方式为蓼型,表明一串红结实率低的原因不是由于雄、雌配子体的发育不良所造成。八种花色的一串红的结实率、落花率及成熟胚珠败育率调查结果表明一串红的平均结实率为15.81%,平均落花率为23.13%,成熟胚珠败育率为84.13%。 一串红组织培养的最佳外植体为带腋芽的茎段,茎段的芽丛诱导的最佳培养基为1/2MS+NAA0.1mg/L+6-BA2.0mg/L+IBA 0.5mg/L,其分化率为71.4%,芽增殖率为140.6%;最佳生根培养基为1/4MS+NAA 0.5mg/L,生根率为91.6%,初步建立了快繁体系。通过RT-PCR方法获得了八种一串红中Ss5MaT1基因的916bp的cDNA片段,根据获得的cDNA片段设计了4对引物,采用嵌套式PCR的方法,以RT-PCR的产物为模板进行扩增,对扩增产物进行SSCP分析,发现只有一对引物的扩增产物出现了差异带,而其它三对引物无差异带。基因测序的结果表明:RT-PCR扩增获得的cDNA片段,同源性相当高,只在鲑鱼肉色花和玫瑰红色花两种花色中发现了一个点突变,即玫瑰红色花在744C T,鲑鱼肉色花中的678C T,玫瑰红色花中的点突变导致异亮氨酸(Ile)突变为苏氨酸(Thr),而鲑鱼肉色花中的点突变导致了缬氨酸(Val)突变成丙氨酸(Ala),而其它花色没有发现突变点。基因克隆测序的结果与PCR-SSCP分析的结果一致,表明PCR-SSCP可以用于花色基因的突变点的检测。
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