目的：从人大肠癌不同远近部位取得组织进行体外培养,探讨人大肠组织体外培养条件,以及在不同条件下,维持肠隐窝完整结构的时间,建立人大肠组织体外培养的平台。用小檗碱处理体外培养的肠组织,探讨小檗碱维持隐窝结构稳定的机制。方法：大肠癌手术时,从距瘤体旁边约2cm、≥10cm,以及两者的中间位(约距瘤体5-6cm)处取得手术标本,运用重复贴壁法进行贴壁培养。逐日观察组织块贴壁和生长情况,在培养3d、7d、14d、20d时,取组织块固定、做病理学观察,以及免疫组化分析。无血清培养条件下,用105μmol/L小檗碱处理培养组织3d、7d,然后对培养组织进行病理检测与免疫组化分析。结果：用含不同浓度FBS(0%、10%、20%)的培养基培养组织并对其进行形态学观察,结果发现：血清浓度越大,组织细胞的生长会越受到抑制,培养期间观察到的从组织中爬出的细胞越少,组织越早发黑死亡。在不含血清的培养液中,组织存活率反而高；最靠近瘤体的组织生长活性最高,中间位及最远端组织依次次之。在含血清的培养液中,对培养不同时间的组织进行病理切片观察,我们发现越靠近瘤体的组织隐窝结构变化越大,甚至消失,距离瘤体越远的组织,隐窝越呈现出规则的微结构。无论是无血清培养还是含血清培养,培养3d组织块隐窝状态没有太大变化,但培养7d后,隐窝内的细胞会逐渐减少,开始崩解。用105μmol/L小檗碱和400ng/mlDkk1处理组织块3d和7d,与无血清培养组织块相比,作免疫组化分析,发现用入小檗碱和Dkk1处理的组织块其隐窝内细胞膜、细胞质、细胞核染色程度与使用无血清培养的组织块无明显差异。结论：人大肠组织块的存活时间与血清浓度成负相关,隐窝完整结构的保持时间与血清浓度呈负相关。尚不能确定小檗碱是通过抑制β-catenin在细胞核中的过度表达,从而抑制隐窝的异常增殖而使组织块隐窝结构保持完整,从而达到防治大肠癌的作用。