手术部常用抑瘤剂及加温条件对A549肺癌细胞的影响

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目的1.碘伏(PVP-I)是临床常用消毒剂,也被手术部护理人员用于灭瘤处理;因其能否对肺癌细胞产生抑制效果尚不清楚,本实验采用体外细胞实验,观察碘伏及其稀释后对肺癌细胞的灭瘤效果。2.观察并比较碘伏、蒸馏水、顺铂溶液在不同温度下对A549肺癌细胞的毒性效应,探讨在不同温度下(37℃、43℃及47℃)的最佳杀瘤组合及所有综合因素下的最佳杀瘤组合,为围手术期护理“无瘤技术”提供实验依据。材料与方法1.选用A549肺癌细胞为研究对象,用含有10%胎牛血清RPMI1640培养液常规培养。2.选用不同药物组合(蒸馏水、0.5%碘伏、0.5%的碘伏加生理盐水2倍稀释液、0.5%的碘伏加生理盐水10倍稀释液、0.5%的碘伏加蒸馏水10倍稀释液、顺铂与生理盐水混合液、顺铂与蒸馏水混合液、设生理盐水组为对照组)和不同的温度(37℃、43℃、47℃)作为处理因素,采用两因素析因设计,根据8种药物组合、3种温度共分为24组。MTT比色法测定OD值,计算细胞的生长抑制率。3.形态学观察:MTT实验之前,以上各个实验组在显微镜下面观察癌细胞的生长状态及形态学改变并照相。4.运用SPSS13.0统计软件对数据进行统计分析。多个均数比较,方差齐的资料采用方差分析法,方差不齐的资料采用非参数检验中的Kruskal-WallisH检验。两因素析因设计资料采用IxJ两因素析因设计资料的方差分析,以a=0.05为检验水准。结果1.0.5%的碘伏液在37℃、43℃、47℃下的对肺癌细胞的抑制率分别为83.64%、84.71%、83.62%,其10倍稀释液的抑制率更高(≥84.75%),37℃下与碘伏原液及蒸馏水比较差异均有统计学意义(P<0.05)。2.各药物组抑瘤效力与温度的相关性:Kruskal-Wallis H检验结果显示,A组单纯高温组、G顺铂加生理盐水组、H顺铂加蒸馏水组分别在不同温度下的抑制率差异有统计学意义(P<0.05);进行方差分析后,结果显示B组蒸馏水、D组碘伏生理盐水2倍稀释液、E组碘伏生理盐水10倍稀释液、F组碘伏蒸馏水10倍稀释液分别在不同温度下的的抑制率差异均无统计学意义(P>0.05)。3.37℃下各组抑瘤效力比较:Kruskal-Wallis H检验结果显示,E组碘伏生理盐水10倍稀释液、F组碘伏蒸馏水10倍稀释液的抑制率最高,与其它各组比较差异均有统计学意义(P<0.05);两者比较差异无统计学意义(P>0.05)。4.43℃下各组抑瘤效力比较:Kruskal-Wallis H检验结果显示,抑瘤效果最强是B、D、E、F组,即蒸馏水组、碘伏与生理盐水的2倍稀释液、碘伏与生理盐水的10倍稀释液、碘伏与蒸馏水的10倍稀释液,四组对癌细胞的抑制率差异无统计学意义(P>0.05);C组碘伏原液跟E组络合碘与生理盐水的10倍稀释液比较有统计学差异,跟其它三组比较有统计学意义(P<0.05)。5.47℃下各组抑瘤效力比较:方差分析结果显示,E、F组顺铂混合液的抑瘤率最高(≥86.55%),与其它各组相比较差异均有统计学意义(P<0.05);两者比较差异无统计学意义(P>0.05)。6.两因素析因分析结果显示,47℃下顺铂蒸馏水组为本实验中最强效抑瘤组合(87.78%),所有药物组对肺癌细胞的抑制率均<100%。结论1.浓度为0.5%的碘伏对肺癌细胞具有很好的抑制作用,同时发现碘伏在较低温度下(37℃)稀释10倍后使用比碘伏原液、蒸馏水更具有抑瘤优势。2.本研究中,蒸馏水、碘伏及其稀释液的抑瘤效力与温度无相关性;顺铂溶液的抑瘤效力与温度有明显协同作用,随温度升高而升高。3.37℃、10min浸泡条件下抑瘤效果最强的药物组是浓度为0.5%碘伏的10倍稀释药(≥85.51%),生理盐水和蒸馏水均为理想稀释剂。4.43℃、1Omin浸泡条件下蒸馏水、碘伏及碘伏稀释液的抑瘤效果比较接近,均为此温度下较强的药物组合。5.47℃、10min浸泡条件下抑瘤效果最强的药物组是顺铂混合液,加温可增加顺铂对肺癌细胞的细胞毒作用,具有热药协同作用,生理盐水和蒸馏水均为顺铂的理想稀释剂。6.本研究中最强效药物组合是47℃下的顺铂蒸馏水组合。虽然所有药物组对A549肺癌细胞均有一定的杀伤作用,但在围术期应用时只能杀死部分肿瘤细胞,并不能完全排除肿瘤细胞种植播散的风险。
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