平菇菌株病毒脱除技术研究

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平菇是我国栽培量最大和栽培范围最广的食用菌,具有广阔的发展前景。随着平菇栽培时间的延长,平菇病毒病日趋严重,导致产量和品质严重下降,制约了平菇生产的发展和菇农经济效益的提高。目前还没有有效的方法防治平菇病毒病。采用有效的脱毒方法是获得无毒菌种,解决平菇病毒病的有效措施。因此,进行平菇病毒的脱除研究具有非常重要的意义。本研究以平菇菌株新831和豫6为实验材料,分别采用菌丝尖端脱毒、原基组织脱毒和原生质体再生脱毒三种方法进行脱毒处理,用dsRNA技术检测脱毒效果,并对三种脱毒处理菌株的生理生化指标及农艺性状进行了研究。主要研究结果如下:1.利用dsRNA技术从平菇菌株新831和豫6的菌丝体中提取到了平菇dsRNA病毒的基因组,共有3个片段,大小分别为8.2kbp、2.6kbp、1.1kbp;酶切验证3个片段均为dsRNA,其中8.2kbp为doublet。2.采用dsRNA技术对三种脱毒方法的脱毒效果进行了检验,结果表明:原基组织脱毒后3条带均依然存在,脱毒效果不明显;菌丝尖端脱毒后,8.2kbp和1.1kbp这两条带完全脱除,2.6kbp的条带也有所减弱,说明病毒的浓度明显减少,但连续十次切取菌丝尖端之后,仍不能达到将病毒完全脱除的目的;原生质体再生脱毒能将病毒完全脱除,是一种有效脱除平菇病毒的方法。3.对三种脱毒处理菌株的生理生化指标进行了研究,结果表明:原生质体再生脱毒菌株的菌丝生长速度、生物量、呼吸强度、纤维素酶活、酯酶同工酶等生理指标均明显优于原代、原基组织脱毒和菌丝尖端脱毒菌株,表明该病毒对平菇的生长和产酶等生理过程有明显的抑制作用。4.对三种脱毒处理菌株的农艺性状进行了研究,结果表明:原基组织脱毒后,产量和子实体形态都变化不大,前两茬菇的产量和生物学转化率仅提高1.0%左右;菌丝尖端脱毒后,前两茬菇的总产量较原代提高9.4~10.3%,生物学转化率提高7.5~8.2%;原生质体再生脱毒后,前两茬菇的总产量较原代提高20.0~25.4%,生物学转化率提高16.0~20.1%;并且菌丝尖端和原生质体再生脱毒后,子实体形态也有明显改观,菌盖宽大、菇体肥厚、外观整齐等,而原代和原基组织脱毒菌株子实体菌肉较薄、大小不一。
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