基于网络药理学的雷公藤红素治疗食管癌的机制研究

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到目前为止,癌症一直是威胁健康且未被完全解决的首要疾病。2016年全球约有450万人死于癌症,2018年我国约有290万人因癌症而死亡。因为人口众多,我国癌症的发病率和死亡率高居不下,带来的健康和财政等各项负担日趋严重。其中尤为严重的食管癌,约三分之一的新发病例在我国,且川东北地区、重庆、河南、河北、福建和山西等诸多地区都是食管癌高发地区。食管癌由于其异质性,易扩散转移,易对放化疗产生抗性,5年生存率一直不超过40%。手术、放疗和化疗等方式是目前治疗癌症的主要手段,但是放化疗伴随着失眠、进食困难、营养不良和吞咽困难等副作用,并且放化疗药物易产生耐药,同时单个分子靶点药物容易产生毒性。为了消除这种隐患,国内外开始转变为“多靶点疗法”,中医药因此获得研究者的关注。在这样的背景下,结合生物信息学、系统药理学、计算机科学和化学等学科综合发展分支出一门新型学科——网络药理学。疾病、药物和生态环境三者之间具有复杂性,网络药理学基于系统的观点能更加清晰的描述这种复杂性,并且对关键靶点和代谢途径的预测有较高的准确性,同时快速找出有毒物质及其机制,消除中药复方潜在毒性的隐患。雷公藤红素是从传统中草药雷公藤根茎部分提取出来的五环三萜类化合物,在抗炎、抗肥胖、抗糖尿病和神经保护等方面取到了巨大的研究进展。近年来,雷公藤红素的抗癌特性也获得了广泛的关注,但是雷公藤红素在治疗食管癌方面的研究较少,具体机制还需要深入挖掘。因此,本文以雷公藤红素为实验材料,按照网络药理学研究模式探索雷公藤红素治疗食管癌的可能作用的关键靶点和信号通路,以及雷公藤红素对人食管癌Eca-109和KYSE-150细胞活性、迁移、克隆、周期和凋亡的影响,同时根据转录组测序结果对雷公藤红素抗食管癌进行差异表达分析,以及相关信号通路在雷公藤红素抗食管癌中发挥的作用。本文所得的研究结果如下:(1)雷公藤红素与食管癌核心交集基因为:TNF、MYC、CCND1、STAT3、CASP3、JUN、AKT1、IL6、MAPK1、MAPK3、RELA、MAPK8。(2)雷公藤红素抗食管癌的有关信号通路为:PI3K-AKT、NF-κB、Wnt和TGF-β信号通路。(3)雷公藤红素抑制食管癌细胞活性,且呈时间依赖性和剂量依赖性(4)雷公藤红素通过抑制Wnt信号通路影响细胞的迁移。(5)雷公藤红素通过抑制CCND1和JUN的表达阻滞食管癌细胞于G1/G0期,从而阻滞食管癌细胞周期。(6)雷公藤红素通过影响食管癌细胞中Bcl-2/Bax、PTEN、p-AKT、和p-mTOR的表达,抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路,从而促进细胞凋亡、抑制细胞增殖和克隆。(7)通过转录组测序共获得2265个差异表达基因,其中上调基因626个,下调基因1639个。(8)差异基因富集于Wnt和mTOR信号通路。(9)雷公藤红素抑制Wnt信号通路以及TNF、CCND1、IL6和JUN的表达。综上所述,雷公藤红素具有抗食管癌的能力。通过PI3K/AKT/mTOR信号通路抑制食管癌细胞增殖、促进细胞凋亡;通过Wnt信号通路抑制食管癌细胞转移;因此,本文的研究为网络药理学的实际应用提供了依据和补充,同时为临床癌症治疗奠定了一定的实验基础。
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