生境片段化所造成的小种群效应(遗传漂变和近交衰退)使夏蜡梅(Sinocalycanthus chinensis(Cheng et S.Y.Chang)Cheng et S.Y.Chang)种群内的遗传变异程度降低,种群间的遗传分化增加。小种群遗传多样性低的根本原因是自身交配系统控制下的“被动”近交,其中传粉载体的行为发挥了重要作用。因而研究夏蜡梅花部性状与传粉昆虫的相互作用,同时结合不同交配方式(自交、近交、远交)后代适合度的研究,可为夏蜡梅种群复壮提供理论依据。(1)通过对夏蜡梅进行人为花部结构的处理以研究不同花部组织对其传粉系统的影响,同时对比同科植物光叶红蜡梅(Calycanthus floridus var.glaucus)传粉系统的研究。主要结果如下:自然条件下夏蜡梅野生种群中共观察到7种昆虫为其传粉,即中华蜜蜂(Apis cerana)、芦蜂(Ceratina sp.)、铜鬃胸蚜蝇(Ferdinandus cupea)、熊蜂属(Bombus)的一种、金丽金龟(Cotalpa lanigera)、瘦天牛亚科(Disteniinae)一种、擬金花虫(Trongylium albopilosum)。在浙江临安引种的光叶红蜡梅上共观察到5种甲虫为其传粉,即:隆肩露尾甲(Carpophilus humeralis)、二色蚁形甲(Formicomus sp.)、螵蛸皮蠹(Thaumaglossa sp.)、甘薯蚁象(Cylas formicarium)、肿须隐翅虫(Pinophilus sp.)。二者的主要传粉昆虫均有甲虫,此外夏蜡梅还有很多蜂类为其传粉,可见夏蜡梅较光叶红蜡梅更为进化。光叶红蜡梅内轮花被片形成的锥形结构与花香相互作用,共同框定传粉甲虫的行为;夏蜡梅以较为鲜明的花色吸引传粉蜂类,而对传粉甲虫的吸引主要是雄蕊。这表明,同科或同类型的植物由于各自生境条件、自身特性、进化选择压力等的差别使植物的性状产生了适应性进化,同样,花部性状也各自演化产生了一定的差异,导致传粉者出现较大的差异,从而影响生殖成功率。(2)研究不同种群和人为控制交配方式即远交、邻近种群异交、同种群异交、自交的遗传效应,结果表明,夏蜡梅接授不同来源(不同地理隔离种群)的花粉后其后代适合度产生明显的差异,不同种群间也有区别:除种子的表型较为稳定外,果实的重量和大小、种子的发芽率、成苗率及种苗生长势均表明远交(临安种群和天台种群进行杂交)存在显著优势;邻近种群异交、同种群异交及同株异花授粉对WSK种群的后代适合度影响不大,其他两个种群后代表现出一定的差异,其中邻近种群异交后代在果实表型和种子出苗率上的优势较大,同种群介于其与同株异花授粉之间,同株异花授粉后代在出苗率和种苗生长势上存在一定的自交衰退;自然授粉后代表现出与同种群异交和同株异花授粉后代相似的适合度,因而推测夏蜡梅种群可能主要存在以上两种交配方式。此外,钨沙矿(WSK)种群的后代受不同交配方式的影响相对较小,双石边(SSB)种群和经过坪(JGP)种群受影响较大,这与其自身种群的大小、密度相关。上述结果不同程度的异交(远交及邻近种群异交)可在一定程度上起到保护并复壮种群的作用。(3)基于夏蜡梅转录组序列开发了共显性的EST-SSR标记用于夏蜡梅的遗传多样性相关研究。从夏蜡梅转录组数据库组装的125014条unigene序列中检测到26564个SSRs,平均密度为5.18 kb。利用L16(45)正交试验获得夏蜡梅的最优SSR-PCR体系:20μL含Taq酶0.6 U、Mg2+1.5 mmol·L-1、d NTP 0.25 mmol·L-1、Primer 0.2 umol·L-1、DNA 75 ng。针对所有EST-SSR位点共设计出15585对符合要求的引物,并随机选择了220对进行PCR扩增,其中120对(54.55%)成功扩增出产物,14对在不同种群个体中扩增出多态位点,平均扩增等位基因数为2.64,7对在种群内个体间扩增出多态位点。这些多态性引物的开发可为夏蜡梅的遗传分析提供更丰富的标记。