山东省水貂五种病毒病分子流行病学调查

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水貂是一种珍贵的毛皮动物,具有较高的经济价值。山东有适宜水貂生长的气候环境和丰富的饲料资源,逐步成为全国水貂养殖大省。然而随着养殖户不断扩大养殖规模、增加养殖密度,饲养管理水平又过于粗放,导致各种水貂疾病也随之发生,给水貂养殖业的健康发展带来了巨大威胁。水貂犬瘟热(Canine Distemper,CD)是由犬瘟热病毒(Canine Distemper Virus,CDV)引起的一种急性、热性、高度接触性的传染病。幼年貂感染死亡率可高达80%~90%,成年貂感染死亡率为30%~50%,患病母貂常常出现流产、空怀和胚胎吸收,是危害我国毛皮动物养殖业的主要传染病之一。水貂病毒性肠炎是由水貂细小病毒(Mink Enteritis Virus,MEV)感染引起的一种以胃肠粘膜发炎、出血及严重腹泻为主要特征的急性、烈性、高致死性和高度接触性传染病,常于7~9月份暴发流行,冬季散发,已发病的貂场常于第二年夏、秋季节再次发病。流感病毒(Influenza Virus,IV)、伪狂犬病毒(Pseudo Rabies Virus,PRV)和圆环病毒(Porcine CircoVirus,PCV)在水貂中一直都是散在发生,没有得到足够的重视,但近几年感染率有所上升。本研究对威海、临沂、日照、潍坊、聊城、济宁、滨州、菏泽八个地区的水貂进行样品采集,其中肛门拭子185份,病死貂381只(分别采集每只水貂的肝、肺、肾、脾、肠、脑),共计566份,其中233份来自威海,86份来自潍坊,171份来自临沂,31份来自日照,14份来自济宁,11份来自菏泽,11份来自滨州,9份来自聊城。用PBS对肛门拭子进行洗脱、离心,收集上清、待检;分别用研磨器对采集的肝、肺、肾、脾、肠、脑等器官组织进行研磨,用PBS制成10%的组织悬液,离心,取上清、待检。采用PCR技术和荧光PCR技术对处理好的样品进行检测。结果显示,CDV的感染率约17%,MEV的感染率为7.95%,IV的感染率为3.53%,PRV的感染率为5.82%,PCV2的感染率为3.53%;混合感染主要出现在CDV和MEV之间,混合感染率为2.83%。实验结果还显示CDV和MEV的发病时间主要集中在夏、秋季节,尤其是7~9月份,IV主要集中在冬季发病,尤其是1~3月份。另外,本研究对分离到的8株CDV毒株的H基因进行了克隆测序、分析。结果显示,8株CDV H基因的核苷酸同源性在99.0~100%之间,其中分离株SDMK07和SDMK08的基因序列同源性为100%;8株病毒H基因与参考毒株的H基因同源性范围为90.0%~99.7%,其中这8株病毒H基因与参考毒株WF1307M的H基因同源性最高,在99.1%~99.7%之间。遗传进化分析说明,这8株CDV都来自同一大分支上,可能是起源于Hamamastu毒株的野毒株。结果表明,CDV依然是危害水貂养殖的重要疫病,且CDV易与其他病原混合感染;MEV在各地区也普遍发生;IV、PRV和PCV2多为散在发生。各病毒的发病时间和病毒流行特点基本一致。本研究对水貂五种病毒病的发病情况做了科学统计,为进一步防治提供了流行病学数据。
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