老年性痴呆（简称AD，1907年由Alois Alzheimer医生发现）为中枢神经系统的一种退行性病变。AD病人的认知功能明显减退，且伴有严重的行为异常，如：易怒、焦虑、沮丧、不辩方向、不安等。AD是一种渐次性疾病，即病人在患病初期症状较轻微，慢慢地各种症状会越来越严重，直至丧失处理日常行为的能力。 乙酰胆碱酯酶（AChE）是与突触体相关联的一种蛋白酶，可促进神经递质乙酰胆碱（ACh）在胆碱能突触体中水解并释放出胆碱，正因此，乙酰胆碱酯酶已成为设计与机理相关的抑制剂的目标酶。近年来，基于“胆碱能假说”，人们将大量的研究集中于寻找高效的、有选择性的AChE抑制剂，从而提高中枢神经系统中蝇碱受体和尼古丁受体处的乙酰胆碱水平。在最初寻找具有强生物活性的AChE抑制剂过程中，人们将精力集中在氨基哒嗪化合物minaprine上。Minaprine不仅表现出抗沮丧的特点且具有类胆碱的功能，鼠体内给药（30mg/kg）后，可明显增加海马（38％）和纹状体（60％）的乙酰胆碱，体外实验表明，对均化的鼠纹状体而言，minaprine是一种作用较弱的可逆竞争性AChE抑制剂(IC₅₀=85uM)，对电鳗AChE的抑制作用更弱(IC₅₀=600uM)，但对蝇碱M1受体却具有高选择性(IC₅₀=17uM)，这促使我们围绕此物质寻找效能更好的AChE抑制剂。 就此目的我们做了大量的研究，现将本文所做的主要工作概括如下： 1．我们以化合物minaprine中的哒嗪环为主要结构单元，并用联苯胺取代其3位上的氨基，从而合成了四种新型的3-联苯氨基哒嗪化合物：3-联苯氨基6-苯基哒嗪（a）、3-联苯氨基-5-甲基-6-苯基哒嗪（b）、3-联苯氨基-6（4-氯苯基）哒嗪（c）和3-联苯氨基-6（4-甲氧基苯基）哒嗪（d）。随后，我们用元素分析、¹H核磁共振谱以及红外光谱对所合成的四种物质进行了表征。结果表明，前三种物质（a、b、c）与预计物相同，但第四种物质（d）的元素分析结果与理论值相差甚远（C、N＞＞0.5％），可能是由于放置时间过长而分解所致。更可喜的是，我们得到了3-联苯氨基-6（4-氯苯基）哒嗪化合物的单晶，这对我们确定该类衍生物的主体结构提供了可靠的依据。 2．同时，我们还预计用4-（2-氨乙基）-1-苄基哌啶取代哒嗪环上的3位氢。从而得到另一类新型的AChE抑制剂。在合成的过程中，可能由于步骤繁琐而未能成功。但我们却在合成4-（2-氨乙基）-1-苄基哌啶的过程中，意外地得到了（1-苄基哌啶-4-某亚基）乙腈的单晶，通过晶体解析确定了其具体结构，这为我们以后工作的进一步开展打下了基础。 3．我们用传统的Ellman分光光度法，以乙酰硫代胆碱碘化物为底物，5，5-二硫-联（2- 山西大学2004届硕士研究生学位论文硝基苯甲酸）（DTNB）为显色剂，研究了电鳗AChE的活性。实验中，我们考察了缓冲液不同的pH值和不同的酶浓度对AchE活性的影响。结果发现:①随着pH值的增加，酶活性在增加，考虑到生理条件，决定取pH=7.20的缓冲液作为以后研究的基准。②随着酶浓度的增加，酶活性也在增加。然后我们以反应的初速度对酶总量作图，得酶浓度曲线。从曲线的走势看，最后决定以0一3min的速度作为酶反应的初速度，并且选定酶总量<0 .04Units作为研究加入抑制剂后对酶活性影响的基准。4.在上述选定的工作条件下，我们研究了37℃下所合成的三种3一联苯氨基哒啧化合物做酶抑制剂时，对电鳗AchE活性的影响情况，以抑制%一109【抑制剂l作图，从而求出了它们抑制AChE的ICS。值.a、b、e三种物质的ICS。值分别为1 .4296 uM、0.5832 uM、0.2998 uM。与minaPrine抑制电鳗AChE所得的ICS。值（600uM）相比，可以看出:我们所合成的三种新型的抑制剂，对电鳗AChE的抑制作用要强得多。比较a、b、c三种物质的ICS。值，我们还可得出如下结论:①当哒嚓环上5位有甲基取代基时要比没有时抑制作用强;②哒嚓环上6位取代基苯环上的4位被氮原子取代后，抑制作用要强得多。由此我们推断:哒嗦环以及哒嚓环上的3位和6位可能分别与AChE的活性位点作用，从而降低AChE的活性。5.我们通过所合成的三种抑制剂对电鳗AChE抑制作用的动力学分析，以及Lineweaver一Burk作图，得到了它们抑制电鳗AChE的类型:部分非竟争性可逆抑制。并且由图中直线与纵轴和横轴的截距，我们还可以分别求出上述几种抑制剂的最大表观反应速度vmaxaPp和表观米氏常数KmaPp。