20例胃淋巴瘤的染色体荧光原位杂交

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目的 自从1983年英国病理医生Isaaeson首先提出胃肠道淋巴瘤来自粘膜相关性淋巴组织的概念以来,人们才开始逐渐对胃淋巴瘤重新认识。随着研究的深入开展,人们越来越深刻地认识到细胞遗传学的改变和肿瘤病理诊断有着密切关系。对胃MALT淋巴瘤的细胞遗传学研究表明3号染色体三体(trisomy 3)比较有代表性,trisomy 3的形成与否可对肿瘤的良恶程度有一定影响。但目前,胃淋巴瘤的发病机制还不够明确,尤其是幽门螺杆菌(HP)与胃淋巴瘤发生及3号染色体三体(trisomy3,一个核中出现3条3号染色体)的关系不清楚。 国内尚无此方面的研究。这主要是由于胃淋巴瘤的发病率很低,占胃肠恶性肿瘤的1%~4%,在一般地区,一年才有2~3例患者,在短时间内收集大量新鲜标本是不太可能的,而以往的细胞遗传学应用的核型(karyotype)分析法,虽能精确了解肿瘤细胞的染色体改变,但它必须使用新鲜组织进行细胞培养,因而不能进行大量回顾性研究,从而使其在常规组织病理学中的应用受到限制。因此,最近发展起来的用石蜡包埋标本进行染色体的荧光原位杂交技术就很好地解决了问题。 本研究采用石蜡包埋标本进行染色体荧光原位杂交(FISH)和免疫组化等方法对20例胃淋巴瘤的病理组织学与遗传学性状进行检测,为研究中国人群中Trisomy 3的表达和胃淋巴瘤及Hp感染的关系提供一些证据,以探讨它们之间的关系,同时也为在国内条件下进行石蜡标本的染色体荧光原位杂交积累一些经验。 实验材料与方法 1.材料:20例胃淋巴瘤标本来自中国医科大学第一临床学院及辽宁省肿瘤医院,时间从 1979到 222年。年龄 19至 72岁,平均53.4岁,其中男女各10人。手术切除的组织标本经10%甲醛固定、石蜡包埋。4 pm厚切片,常规 HE染色。 2.免疫组织化学SP法:兔抗HP(1:20,DAKO)。 3.FISH:40Pm厚石蜡切片脱蜡、脱水。蛋白酶 K消化,匀浆\过滤、离心、涂片。4%多聚甲醛固定。高温变性,-20℃梯度酒精骤冷脱水。预杂交42℃2小时。杂交37℃14.5小时门物根据D3 ZI着丝粒探针设计,由上海生工公司合成,自行FITC标记人PI复染,检测c为了排除在制片过程中相邻核的染色体并人引起结果误差,本研究采用分离的细胞核并用PI染色呈现完整的核形态cFITC标记探针杂交信号呈黄绿色刀标记核呈红色。 实验结果 1.20例胃淋巴瘤包括10例粘膜相关淋巴组织(MALT)淋巴瘤J例弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBL人*例套细胞淋巴瘤(MCL人 23号染色体三体:4O%的病例为3号染色体三体阳性u/20人其中4例MALT淋巴瘤,4例DLBL,而1例MCL阴性。 3.HP检测:17例为阳性,感染率达85%。3号染色体三体阳性的病例都有HP的感染,感染率为100%。 结 论 1.3号染色体三体在部分MALT淋巴瘤发生和转化上可能起 ·2· 到重要作用。 2.胃淋巴瘤和HP感染的关系密切。 3.HP和3号染色体三体之间可能存在某种关系,尚待证实。 4.用FISH检测石蜡包埋标本的3号染色体三体的成功为今 后大量回顾性研究提供了经验。
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