趋磁螺菌群体磁性检测仪的研发

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摘要:趋磁螺菌因其能形成磁小体而具有趋磁特性,本文致力于自行设计并组装一种趋磁螺菌群体磁性检测仪,并以趋磁螺菌Magneto spirillum gryphiswaldense MSR-1为测试对象,利用该检测仪半定量检测其群体磁性,以解决趋磁螺菌群体的胞内磁小体形成情况难以表征的困难,为趋磁细菌的磁性表征提供方便、快捷、灵敏的检测手段。首先,本文基于光散射原理自行构建了趋磁螺菌群体磁性检测仪,包括磁系统和光电检测系统。磁系统由永磁体、硅钢片和纯铁片组成,产生42mT匀强磁场;光电检测系统由可充电蓄电池、发光二极管、硅光电池、精密万用表、支架等构成,分别检测趋磁螺菌在匀强磁场与光线平行和垂直时的光散射值。所构建匀强磁场用MATLAB偏微分方程工具箱和ANSYS软件建模并分析后,结果均显示该磁场为匀强磁场,且磁感应强度的实际值与模拟值无显著性差异,具有一致性;光电检测系统具有良好的稳定性和灵敏性。然后,对Magnetospirillum gryphiswaldense MSR-1的培养条件进行了优化研究,以期在具有较高生物量的同时可获得高产量磁小体。分别探索了接种浓度、装瓶量、补充铁源、Zn2+等因素对该菌生长及磁小体形成的影响。结果表明,初始接种浓度为1×106个/mL时延滞期较短且稳定期较长,较为适宜;不充氮气仅通过装瓶量控制氧浓度不能满足该菌生长的需要;在对数期中期补充铁源可以有效增加磁小体产量,平均每个菌体增加4.3个磁小体;补充Zn2+不但不能提高最大生物量和磁小体产量,却扰乱磁小体链状。最后,本文利用以上检测仪检测MSR-1群体磁性,以验证仪器性能。制备梯度样品,使含磁小体菌体占总菌体百分比分别为0%,20%,40%,60%,80%,100%,并测其在平行与垂直磁场下的光散射值,分别记为OD//和OD⊥,定义磁性物理量:Cmag=(OD///OD(?))-1。结果显示,含磁小体菌体百分比与Cmag呈线性相关,一元回归方程为y=2.2029x+0.0519,R2=0.9383;经F检验,回归方程线性在0.01水平上具有显著性;t检验的P值0.001460028<0.0015,说明其回归系数置信度达99.85%以上
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