【摘 要】
：
【研究背景与目的】高同型半胱氨酸（Homocysteine,Hcy）是神经退行性疾病的高危险因素,目前认为其诱导神经变性的机制与神经炎症有关,但Hcy如何诱导神经炎症及其防治仍有待进一步深入探讨。细胞焦亡可诱导炎症反应,琥珀酸脱氢酶（Succinate dehydrogenase,SDH）亚基A（SDHA）表达异常也将引发炎症反应。因此,本研究将探索Hcy诱导神经炎症反应的机制是否与其促进细胞焦亡
【基金项目】
：
国家自然科学基金 （81971267）；
论文部分内容阅读
【研究背景与目的】高同型半胱氨酸（Homocysteine,Hcy）是神经退行性疾病的高危险因素,目前认为其诱导神经变性的机制与神经炎症有关,但Hcy如何诱导神经炎症及其防治仍有待进一步深入探讨。细胞焦亡可诱导炎症反应,琥珀酸脱氢酶（Succinate dehydrogenase,SDH）亚基A（SDHA）表达异常也将引发炎症反应。因此,本研究将探索Hcy诱导神经炎症反应的机制是否与其促进细胞焦亡和上调SDHA表达有关。三羧酸循环代谢产物Itaconate具有抗炎作用,本研究还将探讨Itaconate能否拮抗Hcy诱导的神经炎症反应?其作用机制是否涉及抑制细胞焦亡和SDHA表达?【方法】1.CCK-8法检测细胞活力;2.免疫荧光法检测HT22细胞形态及Gasdermin D（GSDMD）膜表达水平;3.Western blot检测Nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor protein 3（NLRP3）、Apoptosis-associated speck-like protein containing a caspase recruitment domain（ASC）、pro-Caspase-1、cleaved-Caspase-1、GSDMD和N-terminal fragment of GSDMD（GSDMD-N）等焦亡相关蛋白以及琥珀酸脱氢酶亚基SDHA的表达水平;4.酶联免疫吸附法检测炎症因子白介素-1β（Interleukin-1β,IL-1β）和白介素-18（Interleukin-18,IL-18）的水平。【结果】1.Hcy诱发HT22细胞炎症反应Hcy（1.25,2.5,5 m M）处理24 h后,HT22细胞炎症因子IL-1β和IL-18的含量显著增加。2.Hcy诱导HT22细胞焦亡Hcy（1.25,2.5,5 m M）处理HT22细胞24 h后,（1）细胞活力显著降低;（2）细胞突触受到损伤,GSDMD与细胞膜的共定位及细胞膜破裂程度增强;（3）细胞焦亡相关蛋白NLRP3、ASC、pro-Caspase-1、cleaved-Caspase-1、GSDMD和GSDMD-N的表达水平显著升高。3.Hcy上调HT22细胞中SDHA的表达水平Hcy（1.25,2.5,5 m M）处理24 h后,HT22细胞SDHA的表达水平显著上调。4.Itaconate抑制Hcy诱导HT22细胞炎症反应Itaconate（20,50,100μM）处理10 h后,可使Hcy（2.5 m M,24h）处理的HT22细胞的炎症因子IL-1β和IL-18的含量显著减少。5.Itaconate抑制Hcy诱导HT22细胞焦亡Itaconate（20,50,100μM）预处理10 h后,可使Hcy（2.5 m M,24h）处理的HT22细胞的细胞活力明显增加、细胞突触损伤减少,GSDMD与细胞膜的共定位及细胞膜破裂程度降低、细胞焦亡相关蛋白NLRP3、ASC、pro-Caspase-1、cleaved-Caspase-1、GSDMD和GSDMD-N的表达明显下调。6.Itaconate抑制Hcy上调HT22细胞SDHA蛋白表达Itaconate（20,50,100μM）预处理10 h后,可使Hcy（2.5 m M,24h）处理的HT22细胞的SDHA表达水平明显降低。【结论】1.Hcy诱导的神经炎症涉及到细胞焦亡的促进和SDHA蛋白表达的上调;2.Itaconate具有抗Hcy诱导神经炎症的作用,其机制涉及到抑制细胞焦亡和下调SDHA表达
其他文献
大量研究表明白藜芦醇（Resveratrol,Res）在抗炎,抗氧化,抗肿瘤等领域有着广泛的药理活性,然而因为其水溶性差,生物利用度低等因素严重限制了其在临床上的开发和应用。因此,通过改善Res的溶出度,提高其在体内的生物利用度具有重要临床意义和经济价值。本研究将Res作为基础模型药物,借助Pharm SD系统筛选出合适的配体用作Res固体分散体开发,并且依据Pharm SD系统模拟的制备工艺参数
目的:分析湖南两地新型冠状病毒肺炎（corona virus disease 2019,COVID-19）患者的药物使用情况,并探讨COVID-19患者药学监护要点,旨为COVID-19的药物合理使用及提升药学服务模式提供参考。方法:回顾性分析2020年1月21日至2020年3月2日由衡阳市和邵阳市两地收治的确诊COVID-19患者的病例资料,分析患者的一般资料、临床特征、实验室检查结果、用药情况
目的:探讨葛根素（Puerarin,Pue）在1型糖尿病（Type 1diabetes mellitus,T1DM）中的防治作用,为葛根素应用于T1DM的防治研究提供实验数据。方法:体外培养选用小鼠胰岛瘤细胞MIN6进行细胞实验。CCK8法筛选H2O2建立细胞损伤模型以及Pue保护作用的最佳条件;20μmol/L Pue单独预处理6 h、ERS抑制剂GSK2606414、JAK2激活剂Coumer
【背景与目的】:动脉粥样硬化（Atherosclerosis,As）是冠心病、脑梗死以及大多数外周血管病的主要病理学基础。大量研究表明,As主要在脂质代谢和炎症两方面作用下形成,其中脂质代谢障碍是其发生发展的主要危险因素,巨噬细胞脂质蓄积形成泡沫细胞是其发生发展的病理特征,而ABCA1介导的胆固醇流出减少是泡沫细胞形成的主要因素。ABCA1作为膜蛋白能够利用ATP通过载脂蛋白a-1从细胞中去除脂质
目的:果蝇dfmr1与人类脆性X智力低下基因1（Fragile X mental retardation gene 1,FMR1）序列高度同源、功能相似,在果蝇不同生长阶段dfmr1表达水平不同且受到mi RNA的调控。本课题组前期研究发现,mir-219在果蝇中可以调控dfmr1的表达,但对果蝇生存能力、表型及行为学的影响并不清楚。因此,本文开展Elav-Gal4＞mir-219转基因果蝇功能的
目的:探究黄芩苷（Baicalin）对急性淋巴细胞白血病（Acute lymphoblastic leukemia,ALL）细胞株Reh增殖和凋亡的影响及其可能的分子机制,旨在为将Baicalin应用于ALL临床治疗提供新的策略以及理论参考。方法:将Reh细胞进行体外常规培养,绘制细胞生存曲线。Baicalin处理或联合凋亡抑制剂Z-VAD-FMK或活性氧（Reactive oxygen spec
【目的】探讨BACE1在ox-LDL诱导的内皮细胞凋亡中的作用及机制。【方法】（1）体外培养人脐静脉内皮细胞,用不同浓度的ox-LDL在不同时间点处理内皮细胞,以建立ox-LDL诱导的内皮细胞损伤模型。通过观察细胞形态、数量和密度,检测细胞存活率,确定ox-LDL处理内皮细胞的最适浓度和最佳时间。（2）将培养的HUVECs随机分为两组:空白对照组、100μg/mL ox-LDL处理组,通过LDH试
背景:急性B淋巴细胞白血病（B cell acute lymphoblastic leukemia,B-ALL）是最常见的急性白血病之一。近年来,尽管B-ALL的预后大幅上升,但其复发生存率较低,而复发的主要原因是大部分化疗药物仅通过诱导细胞凋亡发挥抗白血病作用,以致白血病细胞对化疗药物产生耐药性。因此,探索可诱导多种细胞程序性死亡（Programmed cell death,PCD）的药物,从而
目的:探究低剂量辐射对机体mi RNA影响,筛选低剂量辐射生物标志物,为低剂量辐射损伤防护提供实验基础和理论依据。方法:分别用12.5μGy/h,25.0μGy/h,50.0μGy/h辐照C57BL/6J小鼠120 d,每天辐照8 h,摘眼球取血,分离血清,提取血清总RNA,建立小RNA文库,测序得到差异表达mi RNA,并运用GO和KEGG对差异表达mi RNA进行靶基因富集性等生物信息学分析。
目的:乳腺癌是全球范围内女性患病率最高的癌症,也是导致我国女性癌症死亡的首要因素。SUMO特异性蛋白酶（SENPs）是细胞内SUMO稳态维持的核心调控因子。SENP3是SENPs家族成员之一,它通过介导靶蛋白的去SUMO来调节各种胞内蛋白的功能。研究表明,SENP3在头颈癌、胃癌、肺癌等多种癌症中异常表达,并导致细胞增殖、迁移等细胞过程发生异常;但其在乳腺癌增殖和迁移中的功能并不清楚。基于我们前期