非洲猪瘟（African swine fever,ASF）是由非洲猪瘟病毒（African swine fever virus,ASFV）感染家猪和野猪引起的一种高度致命性传染病。其特征是发病过程短,感染后死亡率高达100%。非洲猪瘟于2018年传入我国并持续至今,对我国养猪业造成了严重的影响。由于目前尚无商品化疫苗和有效的治疗药物,只能通过严格的生物安全措施来防控非洲猪瘟。因此,探寻一种能够预防或治疗非洲猪瘟感染的方法迫在眉睫。乳酸菌（Lactic acid bacteria,LAB）是人和动物肠道内的优势群体,具有广泛的益生作用,在维持机体肠道菌群平衡、促进动物营养物质的吸收等方面发挥着巨大作用,对人类和动物的健康至关重要。乳酸菌常被广泛应用于食品、医药、畜牧兽医等工业,随着对乳酸菌研究的不断深入,人们发现乳酸菌还可以防治病毒的感染,这使得乳酸菌的应用扩展到了抗病毒领域。本研究对大兴安岭地区野猪粪便进行分离、鉴定,共得到123株乳酸菌菌株。根据耐酸耐胆盐试验从中筛选出4株具有良好酸和耐胆盐耐受性的菌株:粪肠球菌M6-1、黏膜粘液乳杆菌M4-9、唾液联合乳杆菌M7-8和海氏肠球菌M5-2。随后对这4株菌的黏附能力、抑菌能力以及抗氧化能力进行了测定。根据在结肠癌细胞Caco-2和猪小肠上皮细胞IPEC-J2的黏附结果可知,这4株菌均可在两种不同的细胞上进行黏附,黏附力随菌株不同有所不同。利用牛津杯抑菌试验检测了这4株菌的抑菌能力,根据抑菌环直径大小判断这4株菌对致病性埃希氏大肠杆菌、金黄色葡萄球菌及鼠伤寒沙门氏菌的抑菌作用。最后用两种不同的方法测定了4株菌对自由基的清除率,以此反应其抗氧化能力。结果显示,只有粪肠球菌M6-1和黏膜粘液乳杆菌M4-9具有良好的抗氧化活性。之后利用可以感染HEK293T细胞并在细胞内表达绿色荧光蛋白的传代细胞适应毒ASFV-P60-?CD2v-EGFP评价这4株乳酸菌分离株对ASFV的抑制作用。采用直接观察荧光、荧光定量PCR和ASFV滴度测定的方法进行评价。根据荧光结果可知,只有粪肠球菌M6-1可以抑制ASFV感染HEK293T细胞。随后,利用荧光定量PCR和病毒滴度测定的方法对这一结果进行验证。结果发现,与粪肠球菌M6-1作用后的ASFV基因组拷贝数与病毒滴度均下降,与荧光结果相符,进一步证实了粪肠球菌M6-1对ASFV的抑制作用。之后采用预处理、感染后处理和共孵育三种不同的方式对粪肠球菌M6-1抑制ASFV感染的最佳孵育方式进行探究。结果表明,粪肠球菌M6-1与ASFV共孵育后可抑制ASFV的感染。最后,通过剂量依赖性试验发现这种抑制作用呈剂量依赖性。综上所述,我们分离出一株既具有益生菌特性,又可以抑制ASFV感染HEK293T细胞的粪肠球菌M6-1,该菌株具有开发成为益生菌制剂和抗ASFV制剂的潜力。