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研究背景和目的目前研究表明血管生成与肿瘤的生物学行为密切相关。肝癌是富血管性肿瘤,其高血供、高转移、高复发的特点提示血管生成在肝癌的恶性生物学行为中扮演着十分重要的角色。研究发现,人血管内皮抑制素vasostatin基因不仅在多种实体肿瘤细胞表面有高水平的表达,而且在肿瘤组织新生血管内皮细胞有强烈表达。因此,选择人血管内皮抑制素vasostatin基因或者单克隆抗体来治疗肿瘤是近年肿瘤研究的一个热点。本实验应用免疫组化技术探讨了人血管内皮抑制素vasostatin基因治疗裸鼠皮下种植性人肝细胞癌的效果,以及对肝癌血管生成及肿瘤细胞凋亡的影响,为肝癌基因治疗提供新的思路和方法。研究方法：1.构建人血管内皮抑制素vasostatin基因表达载体vasostatin/pcDNA3.1并转入感受态细菌,提取质粒酶切鉴定。2.60只4周龄雄性裸鼠皮下接种人肝癌细胞株HepG2,建立肝癌动物模型。3.成瘤裸鼠随机分为2组,每组30只。应用电转染方法行人血管内皮抑制素vasostatin基因治疗,对照组以等量空壳质粒替代。观察肿瘤生长情况并记录肿瘤大小,6周后切取肿瘤秤重,计算抑瘤率。4.应用免疫组化技术分别检测整合素反义基因治疗前后裸鼠种植肝癌组织中vasostatin蛋白的表达及其微血管密度(MVD)。5.应用TUNEL法检测治疗组与对照组肿瘤细胞凋亡,计算凋亡指数(AI)并进行组间比较。结果1.治疗组与对照组裸鼠种植瘤的生长情况有明显差异,对照组vasostatin基因组的平均瘤重分别是(1.23±0.82)g、(0.81±0.62)g,两组比较有显著性差异(P<0.05)。2.对照组、vasostatin组的MVD分别是18.26±1.72、5.62±0.59,实验组与对照组比较差异显著(P<0.05)。3.对照组、vasostatin组的AI分别为6.25±1.32、16.48±0.96,实验组与对照组比较差异显著(P＜0.05)。结论1.人血管内皮抑制素vasostatin基因基因治疗能显著抑制肿瘤血管生成。2.人血管内皮抑制素vasostatin基因治疗可明显促进肿瘤细胞凋亡。3.人血管内皮抑制素vasostatin基因治疗对肿瘤的生长有明显的抑制作用。