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目的:纳米乳（nanoemulsions,NE）提高难溶性药物口服吸收已是众所周知,然而当药物还存在肠道首过代谢时,由于NE自身在肠道的消化,对药物的肠道代谢不能提供保护。本实验室对此进行了深入研究,构建了非脂解NE（Non-lipolysis nanoemulsions,NNE）对药物肠道代谢进行保护。本文以在肠道发生II型肠道首过代谢（Intestinal first pass metabolism,IFPM）的难溶性雷洛昔芬（Raloxifene,RAL）为模型药物,对传统的脂解纳米乳（Lipolysis nanoemulsions,LNE）与NNE避免RAL的IFPM,促进其口服吸收进行系统的体内外研究。方法:1.RAL-NE处方优化。在RAL-LNE/NNE中含有的亚油酸（Linoleic acid,LOA）和棕榈酸异丙酯（Isopropyo palmitate,IPP）为非脂解油;大豆油（Soybean oil,SBO）为脂解的油,乳化剂为聚氧乙烯氢化蓖麻油（Cremophor?RH40,RH40）、无水乙醇为助乳化剂,三者比例为3:5:2基础上,以RAL的载药量对处方进行优化,载药量通过RAL在预乳中的溶解度来确定,最后并对制备的NE进行粒径及分布、形态及稳定性进行评价。2.RAL-LNE与RAL-NNE的体外代谢研究。（1）RAL-LNE、RAL-LNE与RAL-NNE加入在含猪胰脂肪酶（PPL）或不含PPL的体外脂解体系中脂解60 min;（2）上述脂解体系加入到加入含UDP-glucuronosyltransferase1A10（UGT1A10）和1A8（UGT1A8）的体外代谢体系中,37℃无氧气浴,温孵120 min;HPLC检测RAL及其代谢产物RAL-6-β-葡萄糖醛酸苷（R-M1）和RAL-4’-β-葡萄糖醛酸苷（R-M2）的含量,最后计算和对比不同制剂的RAL代谢率(W代谢,%)及R-M1和R-M2的生成率(W生成,%)。3.RAL-LNE与RAL-NNE在SD大鼠在体单向肠灌流的吸收机制研究。（1）SD大鼠RAL-LNE在小肠的四种肠段（十二指肠、空肠、回肠与结肠）灌流120 min,测定并计算RAL的有效渗透系数(Peff)和吸收速率常数（Ka）,比较不同肠段吸收差异;（2）比较RAL-LNE与RAL-NNE吸收的差异;（3）SD大鼠肠道吸收机制研究,通过Ka及Peff比较三种胞饮的抑制剂（阿米洛利、氯丙嗪和制霉菌素）对RAL-NNE吸收的影响,探讨吸收机制。4.RAL-LNE与RAL-NNE的SD大鼠和五指山小型猪口服吸收研究。（1）健康雌性SD大鼠,分别按45 mg·kg-1灌胃给予RAL C为2.25mg·mL-1的RAL-NNE、RAL-LNE和RAL-SUSP;以10 mg·kg-1静脉注射RAL-SOL（4 mg·mL-11 RAL）。于规定时间眼眶取血0.4 mL、离心分离血浆、HPLC测定RAL含量,计算各组制剂的生物利用度参数。（2）健康雌性五指山小型猪,给药前注射阿托品、舒泰和速眠新（1:3）麻醉,按10 mg·kg-1分别灌胃给予RAL C为2.25 mg·mL-1的RAL-NNE、RAL-LNE和RAL-SUSP,以1.67 mg·kg-1静脉注射RAL-SOL（4 mg·mL-11 RAL）,前腔静脉取5 mL,离心分离血浆,HPLC测定RAL含量,计算各组制剂的生物利用度参数。结果:1.RAL-NE处方优化。以RAL载药量为指标,对NE中各成分比例进行优化,获得了RAL-LNE和RAL-NNE最佳比例:混合油（LOA:SBO/IPP=2:1）:RH40:无水乙醇=5:3:2;在满足成乳性、24 h稳定性、粒径（<100 nm）和PDI（<0.2）的条件下,以辅料总C为0.067 g·mL-1,RAL C为2.25 mg·mL-1的NE进行后续研究。2.RAL-LNE与RAL-NNE的体外代谢。（1）RAL-SOL在UGT1A8及UGT1A10体外代谢体系中,RAL代谢率分别为57.41±0.86%和99.29±2.83%,R-M1与R-M2的生成率分别为20.61±0.33%,36.71±1.07%;（2）当RAL-LNE加入不含PPL的体外脂解体系中（即不脂解）,然后再加入体外代谢体系时,RAL代谢率低（UGT1A8:-0.69±1.87%,UGT1A10:10.03±0.92%）,而当RAL-LNE加入含有PPL体外脂解体系中（即脂解）,然后再加入体外代谢体系时,RAL代谢率则大幅上升（UGT1A8:46.00±0.83%,UGT1A10:51.83±2.95%）;（3）RAL-NNE加入不含PPL体外脂解体系中,然后再加入体外代谢体系时,RAL代谢率很低（UGT1A8:0.50±0.49%,UGT1A10:5.69±1.34%）,RAL-NNE加入含有PPL体外脂解体系并进行体外代谢,发现与未脂解RAL-NNE的RAL代谢率变化并不大,UGT1A8及UGT1A10代谢率分别为5.70±1.45%（P<0.001）和10.84±3.13%（P<0.001）。体外研究表明,RAL-NNE确实起到了保护RAL不被代谢的作用。与RAL-SOL比较,体外代谢酶为UGT1A8时,经脂解后的RAL-LNE中RAL代谢率显著减少了11.41%（P<0.001）,而RAL-NNE中的RAL代谢率显著减少了51.71%（P<0.001）。体外代谢酶为UGT1A10时,脂解后的RAL-LNE中的RAL代谢率显著减少了47.46%（P<0.001）,脂解后的RAL-NNE中的RAL代谢率显著减少达到88.45%（P<0.001）。因此,在同等的体外代谢体系的条件下,UGT1A10对RAL各制剂的药物代谢作用均比UGT1A8更强。3.RAL-LNE与RAL-NNE在SD大鼠在体单向肠灌流的吸收机制。（1）RAL-LNE在小肠的四种肠段中Ka及Peff的由大到小顺序为:空肠>十二指肠>回肠>结肠,且空肠的吸收程度与任何其它肠段相比均有显著性的差异（P<0.05）。（2）在SD大鼠在体单向肠灌流条件下,RAL-LNE与RAL-NNE并无明显的差异（P>0.05）。（3）三种抑制剂均导致RAL-NNE在SD大鼠空肠RAL吸收不同程度降低,其中制霉菌素抑制组对RAL-NNE抑制程度最大(Ka:3.28–3.91×10-2/min-1、Peff:2.83–3.36×10-3/cm·min-1),其次为氯丙嗪抑制组(Ka:3.30–4.74×10-2/min-1、Peff:3.14–4.15×10-3/cm·min-1),阿米洛利对空肠的RAL-NNE吸收抑制作用最低(Ka:10.45–11.47×10-2/min-1、Peff:11.07–12.41×10-3/cm·min-1);综合上述,说明RAL-NNE在SD大鼠空肠中涉及三种内吞方式进行吸收,既有网格和小窝蛋白介导,亦有巨胞饮介导的途径参与,但以小窝蛋白介导的内吞机制为主。4.RAL-LNE与RAL-NNE的SD大鼠和五指山小型猪口服吸收。（1）SD大鼠中RAL-SUSP、RAL-NNE和RAL-LNE的Tmax分别为3.83±1.47、2.67±0.58和2.67±0.58;Cmax分别为0.24±0.12 mg·L-1、0.38±0.05mg·L-1和0.72±0.26 mg·L-1;AUC0-24h分别是2.12±0.45 mg·h·L-1、4.36±0.93 mg·h·L-1和4.31±0.57 mg·h·L-1;Fa分别是7.01±1.49%、14.43±3.08%和14.25±1.88%。RAL-NNE和RAL-LNE的Fr分别是205.90±43.87%和203.30±26.89%;RAL-NNE与RAL-LNE显著提高了RAL的SD大鼠口服吸收,但两者之间无显著性差异（P>0.05）。（2）五指山小型猪中RAL-NNE的三个Cmax分别为0.42±0.04 mg·L-1、0.43±0.06mg·L-1和1.04±0.11 mg·L-1,对应的Tmax分别是1.33 h、4 h和24 h;RAL-LNE的三个Cmax分别为0.54±0.05 mg·L-1、0.26±0.05 mg·L-1和0.46±0.10 mg·L-1,对应的Tmax分别是2 h、5 h和24 h;而RAL-SUSP的Cmax为0.56±0.08 mg·L-1,对应的Tmax为1 h;RAL-SUSP、RAL-NNE与RAL-LNE的AUC0-36h分别为3.44±0.72 mg·h·L-1,18.62±1.21mg·h·L-1和7.92±0.36 mg·h·L-1。RAL-SUSP、RAL-NNE与RAL-LNE的Fa分别为4.22±0.89%、22.88±1.49%和9.73±0.44%;RAL-NNE与RAL-LNE的Fr分别为541.85±35.33%和230.32±10.49%;RAL-NNE与RAL-LNE均显著提高了RAL的五指山小型猪口服吸收,而且两者之间存在显著性差异（P<0.05）。结论:本文通过体内外的系统研究证明了NNE在胃肠道不被PPL脂解而保持其自身的完整性,从而RAL得到保护,避免了IFPM,五指山小型猪的生物利用度数据表明,与传统的LNE相比,进一步提高了口服RAL的口服吸收。