论文部分内容阅读
第一部分:
偶联C225的Fe3O4/Ag复合纳米颗粒表征及其对人鼻咽癌细胞放射增敏作用初步研究
[背景与目的]:
放射治疗是恶性肿瘤的重要治疗手段之一。随着放疗设备、影像及计算机技术等快速发展，出现了影像引导下的放射治疗(IGRT)。但临床上至今仍未有理想经影像介导的IGRT的特异性示踪剂，如何增加肿瘤放射的敏感性也一直是肿瘤放射治疗领域中倍受关注的问题。本研究旨在构建新型多功能复合纳米颗粒，可同时作为恶性肿瘤的MRI示踪剂、放射线的增敏剂以及抗肿瘤制剂。
[方法]:
制备Fe3O4/Ag/C225，并表征透射电子显微镜(TEM)，能量弥散X射线光谱仪（Energy-dispersiveX-rayspectroscopy，EDS），紫外吸收光谱和动态光散射(DLS)表征复合纳米颗粒Fe3O4/Ag/C225;ELISA法检测偶联抗体西妥昔单抗(cetuximab，C225)在复合纳米颗粒Fe3O4/Ag中的活性保存度;光镜下观察人鼻咽癌肿瘤细胞系(CNEs)在不同浓度Fe3O4/Ag/C225的形态学改变;MTT比色法初步检测Fe3O4/Ag/C225复合纳米颗粒检测其抑制CNEs生长抑制效果;流式细胞术检测CNE在不同浓度下Fe3O4/Ag/C225的凋亡情况;磁共振（MRI）下观测Fe3O4/Ag/C225成像情况;克隆形成实验检测Fe3O4/Ag/C225复合纳米颗粒联合X-ray作用下CNE克隆形成能力;WesternBlot法检测Fe3O4/Ag/C225联合X-ray后EGFR蛋白表达。
[结果]:
TEM示复合纳米颗粒Fe3O4/Ag/C225显示复合材料表征;能量色散X射线光谱仪(EDS)及紫外吸收光谱可见Fe和Ag的特征峰;紫外吸收光谱(UV)和动态光散射(DLS)检测显示偶联C225后的特征;ELISA检测证实在复合纳米颗粒Fe3O4/Ag/C225上C225保持度大于80％;光镜下观察及MTT法检测均提示复合纳米颗粒Fe3O4/Ag/C225对鼻咽癌肿瘤细胞有明显抑制作用;根据MTT结果计算，24h和48hIC50分别为350.49±3.14μg/ml和262.53±4.47μg/ml;流式细胞术检测CNE在不同浓度下Fe3O4/Ag/C225的凋亡明显增加;克隆形成实验显示Fe3O4/Ag/C225复合纳米颗粒增强了CNE的放射线敏感性，增敏比(SER)达2.262倍;WesternBlot法检测提示Fe3O4/Ag/C225联合X-ray后EGFR等蛋白表达下调。
[结论]:
成功制备Fe3O4/Ag/C225，且其在体外稳定性良好;偶联C225的复合纳米颗粒Fe3O4/Ag/C225抗体活性保存良好;体外实验证明该复合纳米颗粒对鼻咽癌肿瘤细胞有抑制作用并对其有明显促凋亡作用。Fe3O4/Ag/C225有望发展成为:a）靶向抗肿瘤制剂;b）具有示踪功能的分子影像引导的调强放疗增敏剂。