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目的:急性淋巴性白血病(Acute lymphoblastic leukemia ,ALL)是儿童最常见的恶性肿瘤之一,白血病细胞可广泛浸润骨骼及肝、脾、淋巴结等髓外器官,髓外白血病易导致骨髓复发,是治疗失败的主要原因,因而髓外白血病的防治是ALL患儿获得长期生存的关键之一。趋化因子CXCR4是基质细胞衍生因子(stromal cell derived factor,SDF-1)受体,SDF-1是主要由骨髓基质细胞产生的趋化因子,两者特异地结合,在造血调节中起重要作用。SDF-1/CXCR4不仅参与维持正常造血细胞的存活和增殖,同时与恶性细胞增殖以及在血液、骨髓、淋巴结的浸润密切相关。RNA干扰(RNAi)作为一种新的基因阻断技术,具有特异的、有效的基因沉默效应,能够简单、高效阻抑特定基因表达,已广泛用于抗肿瘤的基因治疗。Jurkat细胞系淋巴系起源的白血病细胞株,运用RNAi技术,设计针对CXCR4特异性的siRNA转染Jurkat细胞,采用RT-PCR观察RNAi抑制CXCR4基因表达,流式细胞术检测Jurkat细胞周期和细胞凋亡率。RNAi诱导Jurkat细胞发生凋亡和细胞周期阻滞,从而抑制细胞的增殖。用以探索ALL防治的新方法,为ALL治疗提供理论依据。方法:根据CXCR4cDNA符合特征的靶序列,设计并化学合成相关的siRNA。实验分三组:空白对照组A组:Control(不加入CXCR4-siRNA,Non-silencing dsRNA和DMRIE-C),B组:阴性对照组Non-silencing dsRNA (加入Non-silencing dsRNA和DMRIE-C),C组:目的组CXCR4-siRNA(加入CXCR4-siRNA和DMRIE-C)。配成80nM的siRNA溶液。通过脂质体DMRIE-C介导siRNA转染Jurkat细胞,48h后RT-PCR检测CXCR4基因表达水平,运用流式细胞术检测细胞周期分布和细胞的凋亡情况。结果:两对照组间比较差异无统计学意义(P>0.05),目的组与两对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.01)。与空白对照组相比,转染CXCR4-siRNA的Jurkat细胞的CXCR4mRNA表达水平明显下降(56.9%±1. 4%vs68.3%±2.4%),G0/G1期细胞比例增加(35.9%±2.0%vs18.1%±1.3%),G2/M期和S期细胞比例相应下降(20.1%±1.1%vs27.7%±1.5%;44.4%±3.0%vs54.2%±2.6%),凋亡细胞明显增加(20.7%±1.7%vs2.98%±0.3%)。结论:1、利用RNAi技术能够特异性抑制Jurkat细胞的CXCR4基因的表达。2、CXCR4基因沉默后,能抑制Jurkat细胞增殖、促进凋亡。