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无核葡萄品质优良、食用方便,深受消费者喜爱。传统的无核葡萄育种只能以有核葡萄作母本与无核葡萄作父本杂交,杂种后代中无核率低,育种周期长,效率低。胚挽救技术能以无核葡萄作母本,扩大母本的选择范围,极大提高杂交后代中的无核率。但是,目前无核葡萄胚挽救中胚的发育率、萌发率和成苗率依然较低,因此从影响胚挽救成功的关键因素入手,研究无核葡萄胚发育过程中内源激素的变化和优化胚挽救技术体系对提高胚挽救效率具有重要意义。本研究开展了:(1)以有核品种‘京秀’及其F1代无核品种‘秦秀’为试材,研究二者在不同时期胚珠中内源激素含量变化;(2)优化无核葡萄胚挽救技术体系;(3)利用无核基因分子标记对获得的杂交胚挽救苗进行辅助选择,并经炼苗移栽到大田。这些研究将为揭示种子败育型无核葡萄胚败育的机理和优化胚挽救技术体系以提高胚挽救效率提供理论依据,也为进一步培育抗寒无核葡萄新品种奠定材料基础。获得的主要结果如下:1.在相同的取样时期,有核品种‘京秀’的单粒胚珠重量高于无核品种‘秦秀’。与有核品种‘京秀’相比,无核品种‘秦秀’胚珠中生长促进物质(IAA、CTK、GA3、ACC、JA、SA、Put、Spm和Spd)含量较低,而生长抑制物质(ABA)含量较高,(IAA+GA3)/ABA、(IAA+ZT+GA3)/ABA、Spm/PAs、(Spd+Spm)/PAs和(Spd+Spm)/Put的比值较低,可能是导致无核葡萄胚败育的主要原因。2.花前14 d对母本花序浸蘸浓度为30–50 mg?L-1 IBA能显著提高‘红宝石无核’×00-1-5(‘玫瑰香’ב黑龙江实生’)、‘秦红2号’×00-1-5、‘秦红10号’×00-1-5和‘火焰无核’×00-1-5组合胚的发育率、萌发率和成苗率。其中母本‘红宝石无核’‘秦红2号’和‘秦红10号’的IBA最佳施用浓度为50 mg?L-1,而‘火焰无核’的最佳施用浓度为30 mg?L-1。花前10 d对母本花序浸蘸0.5 mg?L-1TDZ能显著促进‘秦红2号’和‘秦红10号’自然授粉和自交胚珠的发育,并进一步提高离体培养条件下胚的发育率、萌发率和成苗率。3.对9个杂交组合‘秦秀’×00-1-5、‘秦红2号’×00-1-5、‘火焰无核’×00-1-5、‘秦红10号’×00-1-5、‘红宝石无核’×00-1-5、‘克瑞森无核’ב木星’、‘火焰无核’ב木星’、‘红宝石无核’ב木星’和‘秦红1号’ב木星’进行胚挽救。研究表明,同一父本与不同母本进行杂交的胚挽救效果不同。当以有核的欧山杂种00-1-5作父本,以‘秦红2号’‘秦红10号’和‘红宝石无核’作母本时,胚的发育率、萌发率和成苗率较高,其中‘秦红10号’×00-1-5的胚发育率、萌发率和成苗率最高,分别为9.52%、5.36%和4.17%;而‘火焰无核’作母本时,胚的发育率、萌发率和成苗率最低,分别为4.85%、2.42%和1.82%。当以无核的欧美杂种‘木星’为父本时,‘红宝石无核’和‘秦红1号’的胚挽救效果较好,‘秦红1号’ב木星’的胚发育率最高,为14.39%;‘红宝石无核’ב木星’和‘秦红1号’ב木星’萌发率最高,均为10.67%;‘红宝石无核’ב木星’成苗率最高,为10.67%。而‘克瑞森无核’ב木星’胚挽救效果最差,胚发育率、萌发率和成苗率仅为9.55%、6.78%和1.76%。整体而言,‘红宝石无核’‘秦红1号’‘秦红2号’和‘秦红10号’适宜作无核葡萄胚挽救的母本,而‘火焰无核’‘克瑞森无核’和‘秦秀’不适宜作胚挽救的母本。对于‘秦红2号’和‘秦红10号’自然授粉和自交,自然授粉的胚挽救效果显著优于自交。4.使用3种不同培养基对4个组合的胚珠进行培养,发现MM3固-液双相培养基比ER和NN固-液双相培养基更适合胚珠培养。此外,将‘秦红2号’×00-1-5和‘秦红10号’×00-1-5的胚珠接种在MM3固体和固-液双相培养基上培养,两个组合在固体培养基上胚的发育率、萌发率和成苗率显著高于固-液双相培养基。萌发成苗中,WPM固体培养基上裸胚培养优于胚珠在NN培养基上直接萌发。以2MS为基本培养基,添加0.2 mg?L-1 6-BA、0.1 mg?L-1 IAA和0.15 mg?L-1 Zn SO4能显著提高畸形苗转化为正常苗的比率。5.通过胚挽救技术共获得9个杂交组合的发育胚866个,其中493个胚萌发成苗。从‘秦红2号’和‘秦红10号’自然授粉和自交,共获得发育胚2797个,其中2363个胚萌发成苗。利用无核分子标记SCF27-2000对9个杂交组合的487株胚挽救苗进行检测,初步筛选出无核株系432个。