黄酮成分对纳米金催化的鲁米诺化学发光体系的作用规律和机理研究

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黄酮类化合物是一种在自然界广泛分布的多酚类化合物,具有特殊的生理活性和药理活性。大量的研究表明,黄酮类化合物具有清除自由基、抗氧化、抗肿瘤、降血糖降血脂等功能,此外,还具有良好的保健的功能。黄酮类化合物以其纯天然、高活性、作用广泛等特点逐渐受到人们的关注。但是,黄酮类化合物种类很多,现有的分析方法大都步骤繁琐、耗费时间,不利于对黄酮类化合物的深入开发。因此,开发高灵敏和简便快速的分析新方法有利于黄酮类化合物的开发利用。化学发光是近几十年来快速发展起来的一种应用范围较为广泛地的分析方法,由于灵敏度高、仪器简单、试剂耗费少,经常被应用于微量及痕量分析领域。但是,有关化学发光的研究一直仅局限于分子和离子水平。而最近几年,将金属纳米粒子作为催化剂、还原剂等应用到化学发光分析使其灵敏度进一步增强。将纳米金催化化学发光体系应用于黄酮类化合物的测定不仅分析速度快,可以用于大量样品的分析,且检测限低可以满足分析的要求。因此,针对黄酮类化合物的特点,设计出新的化学发光分析方法是研究开发黄酮类化合物的新思路。此外,对已有的体系进行深入的探讨研究,发现其新的应用途径也是一种重要的思路。基于以上原因,本论文以黄酮类化合物为研究对象,设计了全新的、离线纳米金参与的化学发光体系,并且探索了新体系的发光机制。同时,将经典的离线纳米金体系与在线纳米金体系应用到黄酮类化合物的检测分析,拓宽其实际应用范围并对其发光现象及规律的差异性进行分析。具体研究工作如下:基于纳米金对鲁米诺–氯化汞化学发光体系有显著的增敏作用,结合流动注射技术,建立了测定木犀草素含量的快速简便的化学发光分析法。研究了影响化学发光的各种因素,探讨了可能的机理。结果显示,0.1mol/L NaOH,4.0×10-4mol/L鲁米诺,6.08×10-5mol/L纳米金与1.0×10-3mol/L HgCl2组成最优的化学发光体系。在优化实验条件下,本方法测定木犀草素的线性范围为2.0×10-9–1.0×10-7g/mL (r=0.9929),检测限为1.5×10-9g/mL,相对标准偏差为2.1%(C=1.0×10-8g/mL,n=11)。利用本法成功地测定了血清与合成样品中木犀草素的含量,平均回收率分别为100.8%和99.5%。研究发现黄酮类化合物对离线纳米金催化鲁米诺化学发光体系的发光信号产生抑制作用,而对在线纳米金体系的信号产生增强作用,同时12种黄酮类化合物分别对离线和在线纳米金体系发光信号的影响程度各不相同。因此,利用紫外可见吸收光谱和流动注射化学发光对其发光现象及规律的差异性进行了探讨。结果表明,黄酮类化合物对离线纳米金催化鲁米诺化学发光体系的信号抑制作用,是受占据位点和清除自由基的共同作用;黄酮类化合物对在线纳米金发光体系产生增强作用,是由于黄酮还原氯金酸增加了反应体系中的纳米金生成量,进而增强了催化作用。该研究进一步拓宽了纳米金催化鲁米诺化学发光体系的应用范围。此外,利用化学发光分析法的高灵敏和简便快速,将来可以应用到对大批量的黄酮类化合物的抗氧化性及其含量进行检测分析。
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